Альтернативные названия: Генное типирование по HLA-B27, англ.: Ankylosing spondylitis HistocompatibilityAntigen.

Определение иммуногенетического маркера HLA-B27 - метод молекулярно-генетического исследования, заключающийся в выявлении в генотипе наличия или отсутствия специфической 27 аллели локуса B. Ген с данной аллелью отвечает за синтез одного из антигенов гистосовместимости, характерного для некоторых аутоиммунных заболеваний, а именно для спондилоартропатий (патологий осевого скелета).

Частными случаями подобных заболеваний являются:

1. Болезнь Бехтерева.
2. Синдром Рейтера.
3. Ювенильный ревматоидный артрит.
4. Псориатический артрит.

Чаще всего эта аллель выявляется при так называемых «серонегативных» вариантах этих заболеваний, когда другими методами подтвердить их невозможно, то есть типичные анализы на ревматоидный фактор и аутоантитела дают отрицательный результат.

Гены HLA расположены на коротком плече VI хромосомы. Для них характерна высокая степень полиморфизма – наличие большого количества вариантов аллелей. Конкретно для HLA-B определено 136 аллелей, многие из которых встречаются только людей определенной расы или национальности.

Материал для исследования: венозная кровь в объеме 5 мл.

Метод исследования: ПЦР – полимеразная цепная реакция.

Особой подготовки к анализу не требуется. Не рекомендуется курить непосредственно перед сдачей крови.

Показания к определению уровня HLA-B27

Анализ используют для дифференциальной диагностики, так называемого суставного синдрома, включающего следующие симптомы:

• асимметричный олигоартрит (поражается один или два сустава с одной стороны);
• боль в поясничной области;
• утренняя скованность суставов более 1 часа;
• энтезит – боль в местах фиксации связок к костям.

Целесообразно назначение анализа при ревматоидном артрите.

В широкой практике метод используется для скрининга, первичной диагностики и оценки прогноза анкилозирующего спондилоартрита.

Референсные значения и интерпретация результатов

Анализ носит качественный характер, то есть данная аллель либо определяется, либо нет.

Отрицательный результат отмечается у большинства людей и свидетельствует об относительно низком риске развития спондилоартропатий, хотя полностью не исключает вероятность их развития.

Положительный результат у людей с суставным синдромом свидетельствует о наличии одной из аутоиммунных спондилоартропатий. В случае положительного результата у здорового человека при проведении скрининга считается, что риск развития вышеупомянутых заболеваний приблизительно в 20 раз выше. Положительный результат у здоровых людей встречается у 7-8% населения. Однако это не значит, что человек обязательно заболеет.

Дополнительные сведения

Ложноположительные результаты отмечаются при разрушении лимфоцитов образца крови, поэтому анализ должен быть проведен в течение 24 часов с момента взятия крови.

Типирование HLA-B27 очень важно при ранней диагностике анкилозирующего спондилоартрита. С момента проявления первых признаков заболевания до появления развернутой клинической картины, позволяющей без сомнений поставить диагноз, проходит от 5 до 10 лет. Связано это с тем, что основной критерий постановки диагноза – рентгенологические признаки сакроилеита (длительного воспаления крестцово-подвздошных суставов).

Наличие только болевого синдрома в спине заставляет таких пациентов долго лечиться у неврологов, не попадая на прием к ревматологу. Назначение в такой ситуации анализа на HLA-B27 может быть достаточным основанием для направления в последующем пациента к ревматологу. Это позволит начать специфическую терапию на ранней стадии заболевания и уменьшить вероятность инвалидизации. Особенно важно это в диагностике подобных болезней у детей.

Литература:

1. Лапин С.В., Мазина А.В., Булгакова Т.В. и др. Методическое руководство по лабораторной диагностике аутоиммунных заболеваний. Санкт-Петербурт, изд. СПбГМУ, 2011.
2. McHugh K, Bowness P. The link between HLA-B27 and SpA--new ideas on an old problem. Rheumatology(Oxford). 2012 Sep;51(9):1529-39.

Когда супруги долгое время не могут зачать ребенка, беременности заканчиваются выкидышами и ЭКО не дает результатов, супруги обращаются к репродуктологам. Бесплодие возникает по разным причинам, и одна из них - совпадение супругов по лейкоцитарным антигенам. Такое совпадение влечет за собой различные патологии, в том числе и хроническое невынашивание плода.

Понятие HLA-типирования и показания к назначению анализа

HLA – это человеческие лейкоцитарные антигены, или система тканевой совместимости человека. HLA является человеческим вариантом главного комплекса гистосовместимости. Его основное предназначение - регулирование работы иммунной системы. Гены, кодирующие HLA, расположены в 7 локусе 6 хромосомы. Этими генами кодируются атигенпредставляющие белки, расположенные на поверхности клеток.

Поскольку данные антигены определяют иммунитет, их необходимо учитывать при трансплантации органов. Игнорирование этого фактора приводит к отторжению пересаженного органа. HLA может уменьшать или увеличивать вероятность развития онкологических опухолей, вызывать появление аутоиммунных недугов.

Немалую роль система антигенов играет в выборе полового партнера. Проведенные в 1980-х гг. исследования показали, что женщины выбирают мужчин с отличающимся HLA. Комбинированные оральные контрацептивы подавляют биологический механизм выбора, и женщин, наоборот, начинают привлекать мужчины с одинаковым HLA.

Чем обусловлен такой выбор? Дело в том, что плод наследует комплекс антигенов от обоих родителей. Для успешного течения гестации важно, чтобы HLA у отца и матери был разным и, как следствие, отличался у матери и эмбриона. Если окажется, что система совместимости у беременной женщины и у ребенка одинаковая, организм матери воспримет тело эмбриона как свои клетки. Иммунная система решит, что это не чужеродный организм, а опухоль, новообразование, и будет атаковать клетки эмбриона.

Совпадение HLA приводит к хроническому невынашиванию, выкидышам, в том числе при ЭКО. Невозможность выносить ребенка является прямым показанием к диагностике лейкоцитарных антигенов, которая называется HLA-типированием.

Классы HLA-типирования и их отличия

Существуют 2 класса HLA:

1. І класс - кодируют гены на локусах А, В, С. Эти антигены представляют собой пептиды - фрагменты белков, разрушенных в протеасомах. Они расположены на поверхности всех клеток, кроме эритроцитов и трофобластов. Если в организм попадает клетка с чужеродным антигеном, к ней стекаются Т-киллеры и уничтожают ее. Наличие некоторых антигенов этого класса вызывает заболевания. Например, если у человека есть антиген В27, то у него разовьются спондилит и синдром Рейтера. Молекула В27 включает аутоиммунные процессы против своего же организма, а запускают ее активность бактериальные инфекции: хламидии, сальмонеллы, шигеллы, клебсиеллы.
2. II класс - кодируют гены на локусах DP, DM, DOA, DOB, DQ, DR. Расположены на поверхностях дендритных клеток, макрофагов и В-лимфоцитов. Доказано, что инсулинзависимый сахарный диабет появляется у людей с антигенами DR3, DR4.

Для определения совместимости супружеской пары имеет значение HLA ІІ класса. Именно клетки, содержащие HLA ІІ типа, вырабатывают антитела к «отцовской части» эмбриона или воспринимают плод как часть женского организма, от которого нужно избавиться.

Как проводится анализ?

Существуют 2 способа проведения анализа на HLA:

• серологический;
• молекулярно-генетический.

При серологическом методе у обследуемого берут кровь и соединяют ее с сывороткой. По тому, выделяются ли антитела, определяется присутствие HLA-антигенов в крови. Этот метод имеет ряд неудобств. Некоторые гены могут оказаться неактивными и не иметь соответствующих им белков, могут быть в слишком низкой концентрации. К тому же возможна перекрестная реакция с другими антигенами.

Второй метод использует полимеразную цепную реакцию и является наиболее точным. Врач-генетик находит и сравнивает нужные участки хромосомы, которые кодируют ген. Каждый ген имеет несколько аллелей - вариантов, которые могут совпадать с аллелями другого человека или нет. Для анализа подойдет любая клетка тела, обычно берут мазок со слизистой оболочки полости рта.

Иногда биоматериал сдает не пара, а только будущий отец. Это объясняется тем, что некоторые аллели влияют на спермограмму, изменяют вид сперматозоидов, их подвижность и жизнеспособность.

Специальной подготовки перед диагностикой не требуется. Супруги обращаются в лабораторию в удобный для них день, сдают биоматериал и ждут результатов. Обычно результаты готовы через 6 рабочих дней.

Расшифровка результатов

Составлением и расшифровкой результатов анализа на HLA-типирование занимаются врач-генетик и врач-иммунолог. По окончании исследования составляют таблицу, куда вносят информацию об обнаруженных аллелях. Сначала генетик вносит буквенно-цифровые кодировки генов: DRB1, DQA1, DQB1, а затем добавляет цифры, шифрующие аллели, причем первые две цифры кодируют номер группы аллелей гена, а остальные две - вариант гена. У взрослых людей при расшифровке DRB1 имеет значение номер группы аллелей, а при расшифровывании остальных - номер варианта.

Совпадение по двум аллелям увеличивает вероятность выкидыша до 35%. При совпадении 4 аллелей супруги считаются полностью несовместимыми для деторождения.

Что делать супругам, у которых совпадают HLA? Врачи предлагают лечить бесплодие с помощью иммунизации:

1. Активная иммунизация. Женщине вводят лимфоциты мужа - так ее организм привыкает к другим клеткам и учится их распознавать.
2. Пассивная иммунизация. Этот метод используют при экстракорпоральном оплодотворении. За 2-3 месяца врачи-репродуктологи назначают специальные препараты: Октагам, Интраглобин, Иммуновенин. Эти лекарства содержат человеческий иммуноглобулин, который повышает содержание антител в организме.

Где можно сдать анализ, сколько это стоит?

Где можно сделать типирование? HLA-типирование - это сложный анализ, который требует применения специального оборудования. Не в каждой больнице есть генетическая лаборатория и специалисты, обладающие необходимыми знаниями. Супругам придется искать специализированные клиники, которые занимаются генетической диагностикой и репродуктивными технологиями.

Сколько стоит анализ? Стоимость HLA-типирования немаленькая и зависит от того, какой конкретно класс антигенов будет исследоваться. HLA-типирование ІІ класса стоит в среднем 5 000-7 000 руб. на одного человека. Следует учитывать, что дополнительно оплачиваются анализ крови и консультация врача-генетика, которая может стоить 1 500-2 500 руб. Еще дороже стоит лечение - цена на лекарства для пассивной иммунизации может доходить до 35 000 руб.

К анализу на HLA-типирование следует прибегать в последнюю очередь. Сначала необходимо исключить другие возможные причины бесплодия и только потом делать генетический анализ.

В последние годы проблема бесплодия супружеских пар, невынашивания беременности становится все более актуальной и требует пристального внимания специалистов. Невынашивание, как и бесплодие, - не какая-то отдельная болезнь. Это следствие неполадок и в репродуктивной системе, и вообще в организме будущих матери и отца. Это симптом: нормальное развитие плода под угрозой, а потому жизнь его невозможна. Причин тут несколько: анатомические врожденные и приобретенные факторы, эндокринная патология, инфекции, иммунологические и генетические причины.

Быстро развивающиеся технологии экстракорпорального оплодотворения помогают решать данную проблему, однако, некоторые генетические аспекты остаются за рамками внимания врачей, что иногда не позволяет достигать желаемого результата.

Проблема раннего невынашивания беременности при отсутствии аномалий кариотипа чаще всего имеет иммунологическую природу. В настоящее время все больше исследователей приходят к выводу о тесной взаимосвязи и взаиморегуляции между эндокринной и иммунной системами, реализующейся в эндометрии на ранних этапах имплантации. Сенсибилизация беременных к отцовским HLA-антигенам плода, сходство супругов по HLA, присутствие в HLA-фенотипе родителей определенных антигенов приводит к спонтанным выкидышам, тяжелым гестозам беременности, врожденным порокам развития плода, снижению сопротивляемости потомства к неблагоприятным факторам окружающей среды.

Что такое HLA?

HLA - human leucocyte antigens - антигены тканевой совместимости (cиноним: MHC - major histocompatibility complex - главный комплекс гистосовместимости).

На поверхности практически всех клеток организма представлены молекулы (белки), которые носят название антигенов главного комплекса гистосовместимости (HLA - антигены). Название HLA - антигены было дано в связи с тем, что эти молекулы наиболее полно представлены именно на поверхности лейкоцитов. Каждый человек обладает индивидуальным набором HLA - антигенов.

Молекулы HLA выполняют роль своеобразных "антенн" на поверхности клеток, позволяющих организму распознавать собственные и чужие клетки (бактерии, вирусы, раковые клетки и т.д.) и при необходимости запускать иммунный ответ, обеспечивающий выработку специфических антител и удаление чужеродного агента из организма.

Состав каждого антигена HLA кодируется соответствующим HLA-геном 6-й хромосомы. Иначе говоря, индивидуальное сочетание HLA-антигенов у конкретного человека определяется индивидуальным сочетанием HLA-генов. Сочетание HLA генов, получаемое от родителей, столь же индивидуально, как и отпечатки пальцев.

Гены, кодирующие HLA расположены в 7-ми областях (локусах) 6-ой хромосомы:
HLA-A,
HLA-B,
HLA-C,
HLA-D - фактически, состоит из 4 локусов: собственно HLA-D и
HLA-DP,
HLA-DQ,
HLA-DR

Каждый из генов может иметь многие десятки вариантов (аллелей, как их называют генетики) - их разнообразные сочетания и формируют множество комбинаций генов. Именно аллели, выявленные при исследовании, указываются в бланке результатов HLA-типирования.

Выделяют 2 класса антигенов HLA. К классу I относятся антигены локусов A, B и C, а к классу II - антигены локусов DR, DP и DQ. Антигены класса I присутствуют на поверхности всех клеток (а также - тромбоцитов), антигены класса II - на поверхности клеток, участвующих в иммунологических реакциях (B-лимфоцитов, активированных T-лимфоцитов, моноцитов, макрофагов и дендритных клеток).

Гены HLA обозначаются теми же буквами, что и кодируемые ими антигены HLA. Названия генов и антигенов HLA состоят из одной или нескольких букв и цифр, например A3, B45, DR15, DQ4. Буква обозначает ген (область и локус), а цифры - аллель этого гена, при этом цифровые обозначения присваиваются по мере открытия новых аллелей.

Значение HLA при беременности.
При наследовании антигенов тканевой совместимости ребенок получает по одному гену каждого локуса от обоих родителей, т.е. половина антигенов тканевой совместимости наследуется от матери и половина от отца. Таким образом, ребенок является наполовину чужеродным для организма матери. Эта "чужеродность" является нормальным физиологическим явлением, запускающим иммунологические реакции, направленные на сохранение беременности. Формируется клон иммунных клеток, вырабатывающий специальные "защитные" (блокирующие) антитела.

Вне беременности иммунные клетки, циркулирующие в организме как разведчики, выслеживают на поверхности всех без исключения клеток белковый код - белки тканевой совместимости. И если обнаруживаются клетки с измененной структурой (это занесенные микробы или измененные клетки самого организма), организм немедленно выдает иммунный ответ - атипические клетки уничтожаются.

При беременности, если бы процесс был таким однозначным, плод неизбежно погибал бы - внутри "чужие" клетки! Но во время беременности плод и его клеточные структуры неразличимы для иммунной системы материнского организма.

В-клетки отвечают за гуморальное звено иммунного ответа, продуцируя антитела. При наступлении беременности, лимфоциты эндометрия вырабатывают "защитные" антитела против отцовских HLA-антигенов. Эти антитела блокируют HLA-антигены отца от эффекторных клеток иммунной системы матери, они защищают плод от материнских естественных киллеров, способствующих отторжению эмбриона.

Несоответствие супругов по HLA-антигенам и отличие зародыша от материнского организма является важным моментом, необходимым для сохранения и вынашивания беременности. При нормальном развитии беременности "блокирующие" антитела к отцовским антигенам появляются с самых ранних сроков беременности.

Сходство супругов по антигенам тканевой совместимости приводит к "похожести" зародыша на организм матери, что становится причиной недостаточной антигенной стимуляции иммунной системы женщины, и необходимые для сохранения беременности реакции не запускаются.

Большое число совпадающих антигенов главного комплекса гисто-совместимости (HLA) у супругов приводит к тому, что зародыш не распознается организмом матери как плод, а воспринимается как измененная клетка собственного организма, против которой начинает работать система уничтожения.

Важное значение для диагностики иммунных форм невынашивания беременности имеет определение генотипа супругов по HLA-антигенам II класса. Желательно проведение фенотипирования по HLA-DR и HLA-DQ антигенам, особенно по HLA-DR, т.к. эти антигены представлены на клетке в несравненно большем количестве и являются ниаболее иммуногенно активными. Для проведения анализа берется кровь из вены, и из полученного образца выделяют лейкоциты (клетки крови, на поверхности которых наиболее широко представлены антигены тканевой совместимости). HLA-фенотип определяется методом полимеразной цепной реакции.

Для преодоления проблемы сходства супругов по HLA-антигенам существует несколько видов терапии: иммунизации матери концентрированной культурой лимфоцитов мужа, таким образом, что антигенная нагрузка увеличивается в 10000 раз по сравнению с нормой; иммунотерапия препаратами иммуноглобулинов человека, фармакологическое действие при этом: иммуномодулирующее, иммуностимулирующее.

Обзор подготовлен Изместьевой М.В. по материалам сайтов: www.cironline.ru, www.cps.org.ru, www.laborutoria.ru.

Иммунные нарушения в организме супругов способствуют многочисленным неудачам при экстракорпоральном оплодотворении. К одной из самых распространённых категорий иммунных нарушений относится идентичность мужа и жены по системе HLA-антигенов.
Анализы на HLA-совместимость супругов в последнее время всё чаще рекомендуют тем парам, у которых уже были неудачные попытки ЭКО. HLA-типирование мужчины и женщины, которые решили прибегнуть к ЭКО, как к последней возможности обзавестись потомством, даёт возможность определить степень «несовместимости». Как правило, HLA-типирование назначают с целью уточнения причины бесплодия, а также для определения методов дальнейшего лечения.

HLA- совместимость

HLA–антигены присутствуют на поверхности почти всех клеток организма, но максимально полно данные молекулы представлены на лейкоцитах, благодаря чему и получили своё название. У каждого человека имеется свой персональный набор HLA-антигенов. Благодаря их молекулам, организм обладает способностью различать свои клетки от чужеродных, вырабатывая при необходимости специфические антитела. Они способствуют уничтожению чужих агентов, в роли которых могут выступать вирусы, раковые клетки, бактерии.

Наличие HLA-антигенов у каждого человека определяется точно таким же персональным набором HLA-генов. Ребёнок получает от своих родителей абсолютно индивидуальное сочетание HLA-генов, сходное по своей уникальности с отпечатками пальцев. Существует 2 класса HLA-антигенов: антигены локусов A, B и C и антигены локусов DR, DP и DQ. HLA-антигены первого класса встречаются на поверхности любых клеток, HLA-антигены второго класса присутствуют только на поверхности тех клеток, которые принимают участие в иммунологических реакциях. К ним относятся активированные Т-лимфоциты, В-лимфоциты, моноциты, дендритные клетки и макрофаги.

HLA- совместимость и беременность

Наследуя антигены тканевой совместимости, плод получает от матери и отца по одному гену каждого локуса. Таким образом, половина антигенов наследуется от отца, из-за чего ребёнок, которого вынашивает женщина, является для неё наполовину чужеродным. При нормальном стечении обстоятельств, подобный фактор относится к разряду обычных физиологических явлений. Запуск иммунологических реакций, обусловленный этим процессом, обеспечивает сохранение беременности. Формирование клона иммунных клеток способствует выработке особых блокирующих антител.

В организме не беременной женщины иммунные клетки, выполняющие роль разведчиков, находят на поверхности любых клеток белки главного комплекса HLA-антигенов. Обнаруживая «чужаков», например, раковые клетки или занесённые извне вирусы, иммунная система отдаёт приказ на уничтожение. Если бы при возникновении беременности этот процесс происходил в таком же порядке, то у плода не было бы шанса выжить, поскольку для организма матери он является «чужаком».

Но подобного не происходит по той причине, что во время беременности иммунная система матери не различает клеточные структуры плода. В этот период В-лимфоциты эндометрия способствуют выработке защитных антител, которые направлены против HLA-антигенов, полученных ребёнком в наследство от отца. Данные антитела обеспечивают блокировку HLA-антигенов отца, защищая их от материнских иммунных клеток, которые выступают в роли разведчиков, благодаря чему последние не в состоянии осуществить передачу информации клеткам-киллерам. По этой причине иммунная реакция организма матери не активируется в ответ на появление изначально «чужих» клеток, и эмбрион благополучно приживается.

При этом огромное значение имеет отсутствие идентичности HLA-антигенов супругов, поскольку лишь в этом случае механизм запуска блокирующих антител, способствующих сохранению беременности. Если же HLA-антигены родителей являются сходными, то антитела, главной задачей которых является блокировка отцовских HLA-антигенов, не вырабатываются. В результате клетки-разведчики воспринимают плод в качестве инородного тела, включая против него систему уничтожения. Итогом этого процесса становится выкидыш. Чем больше антигенов HLA совпадает у родителей, тем меньше шансов выносить беременность.

HLA-типирование

Наличие HLA-идентичности очень часто становится причиной женского бесплодия, либо привычного невынашивания. Именно поэтому пациенткам, избравшим в качестве метода лечения бесплодия экстракорпоральное оплодотворение, врачи часто рекомендуют пройти вместе с мужьями HLA-типирование. Показаниями к HLA-типированию являются не только бесплодие, но и наличие в анамнезе выкидышей или неудачных попыток ЭКО.

HLA-типирование подразумевает анализ полиморфизма HLA и осуществляется он, как правило, двумя способами. Первый из них, классический, базируется на микролимфоцитотоксическом тесте. Применение молекулярно-генетического метода подразумевает проведение полимеразной цепной реакции.

Классическое, или серологическое HLA-типирование, осуществляется на выделенных клеточных популяциях. Поскольку антигены основного комплекса гистосовместимости большей частью несут на себе лимфоциты, для определения антигенов l класса используется суспензия Т-лимфоцитов, для антигенов II класса - суспензия В-лимфоцитов. Для того, чтобы выделить из цельной крови требуемые клеточные популяции, применяются два способа – иммуномагнитная сепарация или центрифугирование. Как правило, в основном используется первый метод, поскольку второй чаще становится источником ложноположительных данных по причине гибели части клеток.

Для проведения лимфоцитотоксического теста HLA-типирования используется специальная сыворотка, в состав которой входят антитела к различным видам антигенов обоих классов. В процессе проведения серологического теста, изучая, какой вид сыворотки вступает в реакцию с лимфоцитами, удаётся выяснить HLA-тип. В случае возникновения реакции между сывороткой и клеткой, на поверхности последней формируется комплекс антиген-антитело. Если в сыворотку влить раствор, в состав которого входит комплемент, разрушение и гибель клетки неизбежны.

Для оценки серологического метода HLA-типирования используется флуоресцентная микроскопия, причём красная флуоресценция означает наличие позитивной реакции, а зелёная – негативной. При определении результата этого метода учитывается специфичность сывороток, проявивших реакцию, а также определённых групп антигенов, вступивших в перекрёстную реакцию. Кроме того, принимается во внимание также и интенсивность цитотоксической реакции.

У этого метода HLA-типирования существуют определённые недостатки:
- низкая экспрессия HLA-антигенов или слабое сродство антител;
- существование перекрестных реакций;
- отсутствие белковых продуктов у некоторых HLA-генов.

Применение молекулярно-генетических способов HLA-типирования подразумевает использование уже готовых синтетических образцов, вступающих в реакцию с ДНК, а не с антигенами, что позволяет с точностью определить присутствие в пробе конкретных типов антигенов. Этот способ, помимо прочего, не нуждается в наличии живых лейкоцитов, с его помощью можно изучить любую клетку организма, а для исследования необходимо ничтожно маленькое количество крови. В некоторых случаях достаточно лишь соскоба, взятого со слизистой оболочки рта.

При использовании молекулярного способа HLA-типирования применяется метод ПЦР. Первый этап – это получение из цельной крови чистой геномной ДНК, тканей или лейкоцитарной суспензии. После этого в пробирке, с помощью коротких одноцепочных ДНК, специфичных по отношению к конкретному HLA –локусу, получают копию имеющегося образца ДНК. Эту операцию повторяют много раз, с целью получения количества ДНК фрагментов, достаточного для визуальной оценки. С этой целью реакционные смеси подвергают гибридизации или электролизу, а затем устанавливают наличие специфической амплификации.

Молекулярно-генетическое HLA-типирование считается более точным, чем серологическое. Обусловлено это наличием стандартизированных образцов. Помимо этого, молекулярное HLA-типирование предоставляет большее количество важной информации, касающейся новых аллелей ДНК, а также обеспечивает более качественную детализацию за счёт идентификации и антигенов, и самих аллелей. Последние, в свою очередь, определяют наличие на клетке конкретного типа антигена.

Если совпадений было много, то зачатие не наступит без соответствующей иммунотерапии. Курс лечения проводят до начала протокола экстракорпорального оплодотворения, и занимает он обычно 2-3 месяца. Пациентке назначают препараты иммуноглобулинов, например, Интраглобин, Октагам и другие. Ещё один курс лечения проводят и в начале беременности, это помогает максимально снизить риск возникновения реакции отторжения эмбриона.

HLA-типирование супругов

HLA-типирование супругов

HLA типирование супругов – один из методов определения причин бесплодия, который основан на изучении иммунологических особенностей организмов мужчины и женщины. Суть методики заключается в определении «совместимости» партнеров.

Особенности HLA-совместимости

HLA антигены – это особые маркеры, которые присутствуют абсолютно во всех клетках живого организма. Они представлены уникальным набором различных последовательностей белковых молекул, которые у разных людей отличаются.

Данные структуры существуют в организме для идентификации «своих» и «чужих» клеток. В норме при проникновении чужеродных микроорганизмов (вирусы, бактерии) или пересадке донорских органов тут же запускаются иммунные реакции, которые проявляются уничтожением соответствующих клеток.

Если в случае с вирусами и патогенными микробами – это хорошо, то при трансплантации пациенты должны употреблять иммунодепрессанты для нормального функционирования нового органа или части тела. По такой же схеме работает противораковая защита организма. Мутирующие клетки тут же распознаются и уничтожаются.

В случае беременности (нормальном её протекании) плод является наполовину «чужим» для материнского организма, поскольку 50% генетического материала он получил от отца. Ребёнок не отторгается из-за механизма синтезирования блокирующих антител, которые предотвращают его гибель. Однако при слишком сильной схожести наборов антигенов у супругов, данный процесс нарушается.

Если анализ HLA типирование фиксирует наличие слишком частых сходств в соответствующих последовательностях мужчины и женщины, это может быть главным фактором невозможности выносить плод. Причина в том, что материнский организм вырабатывает недостаточное количество блокирующих антител. Соответственно ребёнок рассматривается им не в роли «защищенного чужака», а в виде измененных собственных тканей, которые нужно уничтожить.

Как проводится анализ HLA?

HLA совместимость изучается в ряде ситуаций. Показаниями для проведения исследования являются:

• Бесплодие неясного генеза.
• Привычное невынашивание беременности.

Некоторые врачи в подобных ситуациях предлагают своим пациентам пройти HLA типирование. Расшифровка конечных результатов позволит выявить «совместимость» супругов. Тем не менее, данный метод является не единственным способом установления причины патологии. Кроме того, он имеет ряд серьезных недостатков.

Сам процесс исследования полиморфизма HLA-антигенов может проводиться двумя способами:

1. Классический (серологический). В данном случае на основе микролимфоцитотоксического теста проводится анализ наличия специфических антител, позволяющих установить сходство или различие в соответствующих наборах белковых молекул супругов.
2. Молекулярно-генетический. В данном случае используется полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая позволяет более точно оценить наличие уже конкретных генов, кодирующих появление HLA-антигенов.

Лучшим и более востребованным остается именно молекулярно-генетическое HLA типирование. Результаты такого исследования более точны. Ложноположительные и ложноотрицательные результаты встречаются значительно реже.

HLA и ЭКО

При наличии ранее неудачных попыток ЭКО или привычном невынашивании, врачи иногда рекомендуют сдать HLA анализ на совместимость супругов. Это позволит установить присутствие конкретной проблемы и выбрать правильную методику подготовки к соответствующей процедуре. В основном принимается решение о начале иммуномодулирующей терапии, которая позволяет избежать отторжения плода организмом матери.

Анализ на HLA типирование сдать можно в ряде репродуктивных клиник, которые занимаются преодолением бесплодия. На основе изучения 5-9 генов проводится анализ совместимости соответствующих комплексов у супругов. Такие центры предлагают своим пациентам пройти HLA типирование. Расшифровка результатов чаще всего занимает всего несколько дней.

Минусы исследования

HLA типирование супругов, цена которого иногда может быть достаточно высокой (в зависимости от конкретной клиники), имеет несколько очень важных свойств, делающих его не слишком информативным исследованием. Главными из них являются:

• Изучение только 5-9 генов в процессе типирования. Если учесть, что за формирование комплекса HLA отвечает более 100 генов, очевидно, что такая диагностика не является достоверной.
• Стоимость такой услуги как HLA типирование. Цена на каждый отдельный набор генов отличается. Для полного обследования иногда нужно заплатить около 20 тысяч рублей.
• Относительно небольшое число клиник, где можно пройти HLA типирование. Москва и другие крупные города предлагают соответствующую услугу своим пациентам, но в большинстве городов она остается недоступной.

Врачи «ВитроКлиник» считают нецелесообразным прохождение теста на HLA типирование. Стоимость его значительно выше реальной информативности. В большинстве случаев все равно приходится назначать дополнительные методы обследования супругов, так как HLA типирование не позволяет однозначно определить причину бесплодия.