Диагностическое значение определения гликопротеинов. Общий белок сыворотки крови. Методы определения, клинико-диагностическое значение, видовые особенности. Глюкозурия, её причины и диагностическое значение

Ландыш расцветает в мае-июне, плоды созревают к осени и имеют оранжевый или красный цвет. Плоды имеют вид небольших горошин. Красивое душистое растение с мелкими белыми цветками-колокольчиками еще и полезно. Из сырья ландыша получают фармацевтические препараты с кардиотоническим и желчегонным действием. Однако, несмотря на то, что это - лекарственное растение, отравление ландышем встречается нередко. При употреблении в пищу 5 ягод, необходимо срочно обращаться за медицинской помощью.

Все растение и особенно цветы содержат карденолиды – кардиотонические гликозиды. Даже вода, в которой стоит букетик ландышей, становится ядовитой. Гликозиды растения (конвалларии, конвалламарин, конваллотоксин) воздействуют на сердце и обладают в малой степени диуретическим свойством. Превышение концентрации гликозидов растения в несколько раз превышает действие дигитоксина (см. ). Такая реакция называется дигиталисной реакцией организма.

Народные названия: маевка, черемка луговая, лесной язык, конвалия (укр.), заячьи ушки.

Когда ландыш становится ядом?

Попадая в организм в токсической дозе, гликозиды вызывают у пострадавшего усиленное сердцебиение. Вследствие замедления проводимости в сердце, удлиняется фаза диастолы (расслабление сердечной мышцы). Гликозиды стимулируют центр блуждающего нерва, который находится в продолговатом мозге, и подавляют фермент, который регулирует баланс ионов калия, натрия. Благодаря этому ферменту в клетках происходят нормальные процессы передачи нервных импульсов.

В нормальном состоянии фермент во время работы сердца выводит кальций из клеток. При отравлении нарушается выведение кальция. Это приводит к усилению сердечной сократимости, снижению скорости проведения нервных импульсов. При лечении сердечными гликозидами в адекватных дозировках врачи добиваются антиаритмического эффекта. У пациентов стабилизируется сердечный ритм, улучшается почечный кровоток, пропадают отеки.

Из сырья лекарственного растения делают спиртовые настойки, препараты для внутривенного введения для лечения аритмий, сердечной недостаточности, неврозов, отеков. При отечности в области глаз рекомендуют примочки из настоев. Настойку лучше покупать в аптеке и согласовывать дозировку с лечащим врачом. Лекарственные препараты из сырья ландыша рекомендуется применять с пустырником или валерианой. Популярные аптечные средства:

• капли Зеленина;
• ландышево-пустырниковые капли;
• ландышево-валериановые капли;
• Пумпан;
• Валокармид.

Предостережение! Даже аптечные и гомеопатические препараты вызывают отравление и симптомы нарушения сердечно-сосудистой системы. При появлении признаков интоксикации надо срочно вызывать скорую помощь.

Если произошло отравление ландышем, у пострадавшего замедляется пульс вследствие внутрижелудочковой блокады. Развивается нарушение в системном кровотоке, что приводит к дисфункции жизненно важных органов и систем.

Клиническая картина отравления

При отравлении ягодами ландыша у пострадавших появляются симптомы нарушения деятельности ЦНС, возникают расстройства вегетативной нервной системы. Это проявляется:

• приступами тошноты и рвоты (см. );
• расстройством зрения;
• нарушением сознания.

Возникают нарушения со стороны сердечно-сосудистой системы:

• нарушение ритма;
• желудочковая брадикардия;
• АВ-блокада;
• снижение артериального давления;
• коллапс.

Желудочковые экстрасистолы при отравлении ландышем являются предвестником остановки сердца! Возникновение любых нарушений ритма требуют срочного вмешательства врача! Проведение лабораторных исследований крови показывает повышение уровня калия. Проведение кардиографии может показать тахиаритмию, АВ-блокаду сердца.

Оказание первой помощи и дальнейшее лечение при отравлении ландышем

При отравлении ягодами ландыша, которые содержат сердечные гликозиды, перед приездом скорой помощи пострадавшему промывают желудок (см. ). В качестве помощи дают 2 стакана с солью (половина чайной ложки соли на стакан) и вызывают рвоту. Процедуру надо повторить до 4-5 раз. Если в аптечке нет сорбентов, можно дать 100 г сухарей из черного хлеба. Желательно сделать клизму или дать слабительное средство быстрого действия (30 г сульфата натрия).

В больнице проводят промывание через зонд с введением 100г измельченного активированного угля. Уголь в отличие от других сорбентов обладает высокой сорбционной активностью по отношению к растительным токсинам.

Пациентам назначают форсированный диурез – введение внутривенно растворов и мочегонных препаратов. Для учета водного баланса больным ставят мочевыводящий катетер. В случае снижения сердечных сокращений (брадикардии) с целью профилактики остановки сердца пострадавшим показано введение Атропина. При нарушении ритма назначают Лидокоин или Фенитоин.

Важно! Пациентам строго противопоказано введение растворов и препаратов кальция. Гиперкальциемия при отравлении сердечными гликозидами приводит к развитию устойчивого сердечно сокращения – «каменному сердцу».

Одновременно пациенту проводят гемосорбцию и антидотную терапию. Гемосрбция относится к методам внепочечного очищения крови от токсинов с помощью специального устройства с емкостью для сорбентов. Кровь больного прокачивается через аппарат с сорбентами и очищается от ядов.

Важно! При проведении гемосробции у пациента могут возникать осложнения: снижение артериального давления, озноб, кровотечения, эмболия сосуда пузырьком воздуха или сорбентом.

Антидотная терапия заключается в введении препаратов с противоположными свойствами. При брадикардии вводят Атропин, при нарушении сознания с бредом и галлюцинациями – Нивалин, Физостигмин или Аминостигмин. При резком снижении артериального давления показано введение внутривенно препаратов крови или кровезаменителей. При остановке сердца проводится сердечно-легочная реанимация, введение Адреналина или Норадреналина.

Последствия

Последствия отравления опасны для здоровья и жизни детей, а также пациентов с сердечной недостаточностью. Не оказание неотложной помощи может привести к смертельному исходу. Опасны последствия и для лиц с дисфункцией почек. У таких пациентов интоксикация гликозидами приводит к почечной недостаточности.

Узнайте, . Характерные симптомы интоксикации и неотложная помощь

Почему ? Как происходит отравление и оказание помощи потерпевшему.

Все об : химический состав растения, влияние ядов на организм, симптомы, лечение.

Профилактика отравления ландышем

С целью профилактики необходимо придерживаться основных правил:

1. Не собирать ландыш для приготовления лекарственных препаратов, если не уверены в своих знаниях.
2. Не покупать лекарственное сырье с рук.
3. Не принимать аптечные препараты на основе ландыша без консультации врача.
4. Нельзя превышать дозировку лекарственных препаратов.
5. Нельзя слушать советов знакомых, так как дозировка подбирается индивидуально для каждого пациента в зависимости от состояния и сопутствующих болезней.
6. Нельзя давать детям ландыши, так как все растение ядовито.
7. Если в семье есть маленькие дети, надо следить за тем, чтобы ребенок не выпил воду из вазы, где стояли ландыши.

Помните, что сердечные гликозиды, входящие в состав ландыша, могут привести к летальному исходу, если вовремя не оказать первую помощь.

Автореферат диссертации по медицине на тему Диагностическое значение определения трофобластического В1-гликопротеина и продуктов ПОЛ в оценке состояния фето-плацентарной системы при гестозах

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МОСКОВСКАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ имени И.М. СЕЧЕНОВА

На правах рукописи УДК 618.3-008.6-07:618.36

АЛЕКСАНДРОВ ЛЕОНИД СЕМ^ ,ВИЧ

ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРОФОБЛАСТИЧЕСКОГО В^ГЛИКОПРОТЕИНА И ПРОДУКТОВ ПОЛ В ОЦЕНКЕ СОСТОЯНИЯ ФЕТО-ПЛАЦЕНТАРНОЙ СИСТЕМЫ ПРИ ГЕСТОЗАХ

14.00.01 - акушерство и гинекология

Москва - 1992

Работа выполнена имени И.М.Сеченова

Московской медицинской академии

Научный руководитель: Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Н.М. Побединский

доктор медицинских наук, профессор Е.А. Чернуха

доктор медицинских наук, профессор И.Б. Манухин

Ведущая организация: МОНИАГ МЗ РФ

Защита состоится " "_ 1992 г.

в - ■ - часов на заседании специализированного Совета Д 074.05.02 Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова (г. Москва, ул. Б.Пироговская, д. 2/6).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова (г. Москва, Зубовская площадь, д. 1)

Ученый секретарь специализированного совета, доктор медицинских наук

А.М. Шелутко

ГОСУАД?-: :j ля

SHi>i"iviw ä Г: г, А

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Несмотря на значительные успехи акушерской науки, проблема беременности, осложненной гестозом, является одной из самых актуальных, так как именно гестозам принадлежит одно из первых мест в структуре материнской и пеританальной заболеваемости и смертности (Савельева Г.М., 1991 г., Репина М.А., 1991 г.) .Частота возникновения перитональных осложнений в зависимости от тяжести гестоза колеблется в пределах от 7,7% до 44,4% (Каршунина JI.M., Кагенюк Ю.А., 1984 г., Сокольский Я.П., 1981 г.), и несмотря на достигнутые в последнее время успехи не имеет устойчивой тенденции к снижению. Поэтому изучение патогенеза фето-плацентарной недостаточности при гестозе, разработка адекватных методов ранней диагностики нарушений состояния внутриутробного плода имеет очень большое значение. С этой точки зрения несомненный теоретический и практический интерес представляет изучение специфических плацентарных антигенов, в частности трофобластического В1-гликопротеина (ТБГ). Поскольку плацента представляет собой орган, специфический для эмбрионального периода, сывороточный уровень ТБГ может позволить объективно оценить изменение специфического биохимического статуса, возникающего при беременности. Имеющиеся же данные о динамике содержания ТБГ при неосложненном.естационном процессе и при гестозе достаточно противоречивы.

В последние годы показана важная роль в патогенезе многих эндокрино-обменных заболеваний и патологических состояний нарушения регуляции процесса свободно-радикального окисления липидов (ПОЛ). Состоянию системы ПОЛ при гестозе посвящен ряд работ (Ганина A.A., 1985 г., Грищенко В.И. с соавт., 1986г., Кущ И.Б., 1986 ., Лебеденко B.C., 1987 г.), однако, в большинстве своем, объектом изучения являласьсыворотка крови или мембрана эритроцита, и лишь в отдельных работах изучался процесс ПОЛ в структурных элементах трофобласта. Помимо этого, недостаточно комплексных исследований, позволяющих с разных сторон оценить состояние фето-плацентарной системы при гестозе, в связи с чем актуальным представляется изучение взаимосвязи динамики ТБГ ипроцессов ПОЛ с гормональной функцией фето-плацентарного комплекса.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования является совершенствование методов диагностики состояния фето-плацентарной системы при гестозах. В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:

1. Изучить содержание ТБГ в сыворотке крови в динамике физиологической беременности;

2. Выявить особенности изменения уровня ТБГ при беременности, осложненной гестозом различной степени тяжести в динамике, определить влияние различных клинических проявлений гестоза на уровень сывороточного ТБГ;

3. Определить особенности изменений ТБГ при развитии фето-плацентарной недостаточности при гестозе;

4. Изучить влияние различных клинических проявлений гестоза на гормонпродуцирующую функцию фето-плацентарного комплекса;

5. Выявить особенности регуляции реакций ПОЛ в плаценте, а аткже состяние антиоксидантной системы крови при гестозе различной степени тяжести, их зависимость от формы и длительности гестоза и при развитии фето-плацентарной недостаточности.

Научная новизна. Впервые в нашей стране проведено изучение содержания ТБГ в сыворотке крови в динамике физиологической беременности с 8 до 42 недель с двухнедельным интервалом, изучено содержание ТБГ в сыворотке крови в динамике при чистых и сочетанных формах гестоза. Выявлен характер взаимодействия между процессом ПОЛ в плаценте и активностью антиоксидантной системы крови при гестозах различной степени тяжести, зависимость этих процессов от формы и длительности гестоза, их состояние при фето-плацентарной недостаточности.

Теоретическая и практическая значимость работы. Комплексное исследование состояния фето-плацентарной системы при гестозах различной степени тяжести позволяет расширить современные представления о патогенезе развитияфето-плацентарной недостаточности при гестозе, дать оценку диагностической и прогностической значимости комплексного определения ТБГ, эстриола, прогестерона и кортизола в крови беременных с гестозом, научно обосновать применение антиоксидантной терапии при гестозе.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Осложнение беременности гестозом вызывает патологические изменения в состоянии фето-плацентарного

гомеостаза, выражающиеся в нарушении синтеза ТБГ, гормональной функции плаценты, взаимоотношения про- и антиоксидантных систем.

2. При физиологической беременности содержание ТБГ в сыворотке крови прогрессивно нарастает до 36 недель беременности, после чего происходит снижение уровня к сроку родов. Развитие гестоза сопровождается снижением уровня ТБГ и характера его динамики. Выявленные нарушения находятся в прямой зависимости от степени тяжести гестоза и его клинических особенностей. Развитие фето-плацентарной недостаточности также сопровождается снижением уровня сывороточного ТБГ, что можно использовать в комплексной диагностике состояния фето-плацентарной системы при гестозах.

3. Гестозы приводят к нарушению гормональной функции фето-плацентарной системы, степень и характер которого находится в зависимости от клинических особенностей заболевания и отражает этапы компенсаторно-адаптационных нарушений в системе мать-плацента-плод.

4. Развитие гестоза сопровождается дисбалансом про- и антиоксидантных систем, характер которого зависит от клинических проявлений заболевания. Легкая форма гестоза характеризуется активацией реакций ПОЛ в плаценте и компенсаторным повышением антиоксидантной активности крови; при средней и тяжелой форме заболевания, на фоне более выраженной интенсгфикации ПОЛ в плаценте.

Апробация клинических итогов работы. Работа выполнена на кафедре акушерства и гинекологии I лечебного факультета Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова. По теме диссертации опубликована одна печатная работа, две - приняты в печать. Статьи отражают основные положения диссертационной работы. Апробация диссертации состоялась 13 мая 1992 года на заседании сотрудников кафедры акушерства и гинекологии I лечебного факультета.

Объем и структура работы. Диссертация сотоит из введения, обзора литературы, общей характеристики собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций, списка литературы. Работа изложена на 109 страницах машинописного текста, иллюстрирована 13 рисунками и 50 таблицами. Литературный указатель содержит 169 отечественных и 105 иностранных источников.

Общая клиническая характеристика обследованных пациенток. С целью выполнения поставленных задач в настоящей работе проведены: клиническое обследование, анализ данных анамнезу, течение и ведение беременности и родов, состояние новорожденных у 318 женщин. Подбор беременных проводился методом случайной выборки. Все обследованные женщины были распределены на две основные группы: контрольную группу составили 198 женщин с неосложненным течением беременности, основную - 120 женщин, беременность которых осложнилась гестозом различной степени тяжести.

Характеристика контрольной группы. 198 пациенток в возрасте от 17 до 40 лет. Обследование проводилось в сроках от 8 до 42 недель с двухнедельным интервалом. В контрольную группу не были включены беременные с "высоким риском" возникновения гестоза в связи с сопутствующей соматической патологией и высоким инфекционным индексом. Наиболее часто в анамнезе обследованных женщин контрольной группы встречались: ветряная оспа - 14.64%, корь - 17,11%, грипп - 26,26%, ОРВИ - 34,84%.

Через естественные родовые пути роды произошли у 178 женщин, из них у 170 (89,9%) в головном предлежании, у 8 - в тазовом. 20 беременных были родоразрешены путем операции кесарева сечения.

Все дети родились с оценкоц по шкале Апгар на первой минуте жизни - 7-8 баллов, на 5 минуте - 8-9 баллов. Масса новорожденных составила от 3000 до 4500 гр (в среднем 3650+74,30 гр). Послеродовой период у родильниц и ранний неонатальный период у новорожденных протекал без осложнений.

Характеристика_основной_группы. Основную

группу составил и 120 пациенток, беременность которых осложнилась гестозом различной степени тяжести. Оценка тяжести заболевания проводилась по бальной системе (Методические указания МЗ СССР, 1987 г.). По степени тяжести гестоза женщины основной группы была разделены на три подгруппы: I подгруппу составили 42 беременных с гестозом легкой степени, во II вошли 43 беременных с гестозом средней степени тяжести, в III - 35 женщин с

тяжелой формой гестоза. Обследование проводилось в сроки 23-24, 31-32, 35-36, 37-38, 39-40 недель. Все обследованные были в возрасте от 16 до 41 года. Из перенесенных инфекционных заболеваний чаще всего в основной группе встречались: корь - 22,5%, грипп -30,8%, скарлатина - 20,8%, хронический тонзилит - 16,7%. В целом же, в основной группе был отмечен более высокий инфекционный индекс. У 62 (51?6%) беременных. гестоз развился на фоне экстрагенитальной патологии: вегетососуднстой дистонии по гипертоническому типу - у 32 (26,7%), гипертонической болезни I-II степени - у 9 (7,5%), хронического пиелонефрита - у 19 (15,8%), ревмакордита - у 2 (1,7%). Наиболее часто, в 77,14% экстрагенитальная патология наблюдалась в III подгруппе. Течение настоящей беременности помимо гестоза осложнилось угрожающим выкидышем у 16 беременных (13,3%), угрожающими преждевременными родами - 6 (5%), анемией - у 30 ("%%), острыми респираторными инфекциями - у 12 (105). При обследовании беременных основной группы ангиоспазм артерий сетчатки выявлен: в 1 подгруппе - у 2 женщин (4,76%), во II - у 7 (16,28%), в III - у 17 пациенток (48,%.%). С целью определения состояния белковообразующей функции печени и жирового обмена проводилось определение в сыворотке крови матери содержания общего белка и холестерина (табл.1). Представленные данные свидетельствуют о более низком содержании общего белка и более высоком содержании холестерина в крови беременных с тяжелыми формами гестоза.

Среди рожденных в срок детей хроническая внутриутробная гипоксия плода диагносцирована у 21 новорожденного, внутриутробная гипотрофия - у 11,

морфофункциональная незрелость - у 11. Наиболее часто, в 57% развитие фето-плацентарной недостаточности наблюдалось у женщин III подгруппы.

Через естественные родовые пути роды проведены у 91 родильницы, из них в головном предлежании - 88, в тазовом - у 4. Операция наложения акушерских щипцов проводилась в двух случаях: по поводу острой начавшейся гипоксии плода и в связи с тяжелой формой нефропатии. Абдоминальным путем родоразрешены были 28 женщин. При анализе отмечается увеличение частоты абдоминального родоразрешения во II и III подгруппах. Повышение частоты

абдоминального родоразрешения было связано, в основном, с неэффективностью проводимой комплексной терапии гестоза, соответственно 6,98% и37,14%. Средняя масса новорожденных соответственно по подгруппам составила: 3515+-94.8 г, 3472+87,19 г и 3042+-79,15 г.

Таблица 1

Основная группа

Контрольная группа I подгр. II подгр. III подгр.

Общий белок 65.26+-0.54 64.75+-2.01 61.50+-1.16 57.21+-1.28*

Холестерин 7.50+-0.54 8.14+-0.49 8.60+-0.24* 9.26+-0.62*

*р 0.05 при сравнении с контрольной группой.

Содержание ТБГ в динамике физиологической беременности. Всего было обследовано 198 беременных женщин с неосложненной беременностью. У каждой пациентки пробы крови брались от 1 до 3 раз, с интервалом в 2 недели, в сроках от 8 до 42 недель. Результаты представлены на рис. №1. Отмечено прогрессивное повышение концентрации ТБГ до 36 недель беременности с последующим снижением к 42 неделям. Содержание ТБГ в сроке 7-8 недель составило 36+-4,10 мкг/мл. Далее, до 26 недель уровень ТБГ резко возрастал до 135,68+-9,09 мкг/мл. Двухнедельный прирост составил от 10,0 до 33,4%. Статистически достоверной разницы между каждым последующим сроком не отмечалось (р>0,05). В 27-28 и в 31-32 недели отмечено снижение концентрации сывороточного ТБГ соответственно на 8,2% (р>0,05) и 3,9% (р>0,05). Далее содержание белка

прогрессивно увеличивалось до 157,06+-11,74 мкг/мл, достигая своего максимума к 36 неделям беременности. Темпы двухнедельного прироста концентрации ТБГ были заметно снижены и составили 4,7-6,2% в III триместре беременности.

После 36 недель уровень ТБГ незначительно снижался к 40 неделям до 137.06+-10.93 мкг/мл (на 14% (р>0.05)). Затем к 42 неделям происходило резкое падение уровня белка до 99.59+-Ö.59 мкг/мл (р<0.05).

При индивидуальном анализе отмечается значительная вариабельность содержания ТБГ в сыворотке крови, так, в сроке 7-8 недель колебания его находились в пределах от 15.60 до 54.60 мкг/мл, а в сроке 35-36 недель - 112.42237.50 мкг/мл, в связи с чем определение ТБГ необходимо проводить в динамике.

При изучении корреляционной зависимости уровня сывороточного ТБГ с весом плода при рождении отмечена умеренная корреляционная зависимость =0.583.

Получение результаты позволяют сделать вывод о возможности использования определения сывороточной концентрации ТБГ для контроля за течением гестационного процесса.

Содержание ТБГ при различных клинических проявлениях гестозов. На основании полученных результатов (рис.2) установлено, что содержание ТБГ при беременности, осложненной гестозом легкой степени достоверно не отличается от его уровня при нормальной беременности. Концентрация ТБГ достоверно отличалась от конторольной группы лишь в сроке 23-24 недели и составила 89.5+-63 мкг/мл (р<0.05). Затем уровень белка прогрессивно нарастал до 36 недель беременности, достигая 160.43+-14.92 (в среднем на 57.8% (р<0.05)), после чего происходило его снижение к сроку родов до 137.38+-41.42 мкг/мл (на 41.42% (р<0.05)). Более выраженное снижение уровня ТБГ в исследуемые сроки наблюдалось во II подгруппе. В 23-24 недели уровень его в сыворотке крови составил 74.0+-9.98 мкг/мл, что на 14.3% ниже, чем в I подгруппе (р<0.05), и на 36.32% чем в контрольной группе (р<0.05). Далее концентрация ТБГ увеличивалась к 36 неделям до 137.33+-30.03 мкг/мл, достигая своего «пика» (р<0.05), формируя своеобразное «плато». В III подгруппе концентрация белка в сроке 23-24 недели составила 22.75+-0.9 мкг/мл и была в 4 раза ниже, чем в I подгруппе, и в 5.1 раза ниже, чем в контрольной группе. Далее уровень ТБГ нарастал, составив в 35-36 недель 114.50+-37.21 мкг/мл,

Легкая степень -ж-

Средняя степень

Тяжелая степень -X-

Чистая форма Сочетанная форма

т. е. в 4.2 раза. До 37-38 недель уровень белка оставался практически неизменным - 112.75-»-11.97 мкг/мл (р>0.05), после чего происходило его снижение к сроку родов до 88.17+-7.17 мкг/мл (р<0.05). На рис.2 приведены данные исследования, содержания ТБГ при «чистой» и сочетанной форме гестоза.

Анализ результатов свидетельствует, что «чистые» и смешанные формы гестозов, в целом, характеризуются более низкой секрецией ТБГ по сравнению с физиологической беременностью. Наиболее низкий уровень ТБГ отмечался при сочетанной форме гестоза.

В группе женщин, родивших доношенных плодов с признаками внутриутробной гипотрофии, уровень ТБГ был достаточно снижен по сравнению с контрольной группой (р<0.05) и составил 86.25+-26.87 мкг/мл. Развитие хронической внутриутробной гипоксии характеризовалось снижением содержания ТБГ до 100.14+-17.52 мкг/мл (р<0.05). Уровень ТБГ в сыворотке крови женщин, родивших детей с признаками морфофункциональной незрелости составил 106.70»-12.56 мкг/мл. Из доношенных новорожденных основной группы 28 родились в состоянии средней тяжести и 7 - в тяжелом состоянии. Уровень ТБГ в этих группах составил соответственно 130.67+-12.99 мкг/мл (р>0.05) и 92.67+-7.51 мкг/мл (р<0.05).

При анализе зависимости концентрации ТБГ от длительности гестоза, отмечено что значение ТБГ было резко снижено в группе беременных с ранним началом гестоза (в 23-24 нед.) на 38.06% и достоверно отличалось (р<0.05) от содержания его в крови беременных с поздним началом гестоза (в 36-40 нед.).

В основной группе не отмечено корреляции между массой плода при рождении и уровнем ТБГ в сыворотке крови (г=0.067). Полученные результаты позволяют считать, что снижение содержания ТБГ при гестозе служит неблагоприятным диагностическим признаком и позволяет использовать опрелеление его в сыворотке крови матери в качестве одного из методов в комплексной диагностике состояния фето-плацентарной системы и прогнозирования исхода родов и плода.

Влияние клинических проявлений гестозов на содержание гормонов фето-плацентарного комплекса. Результаты анализа динамики содержания эстриола, прогестерона и кортизола в крови матери показали, что по мере развития

физиологического гестационного процесса происходит прогрессивное повышение содержания этих гормонов. Так, содержание эстриола с 23-24 нед. к окончанию беременности увеличивалось с 46.21+-7.23 нмоль/л до 121.76+-13.07 нмоль/л (в 2.63 раза (р<0.05)), прогестерона с 87.31+-4.25 нмоль/л до 197.91+-20.26 нмоль/л (в 2.27 раза (р<0.05)), кортизола с 821.44+-81.61 нмоль/л до 1081.08+-89.05 нмоль/л (в 1.32 раза (р<0.05)) (рис.3,4,5).

При беременности, осложненной гестозом легкой стадии наблюдалось незначительное снижение содержания эстриола, прогестерона в крови матери по сравнению с контрольной группой. Однако, необходимо отметить, что в отличии от контрольной группы отмечалось падение концентрации прогестерона после 38 нед. беременности, а также стабилизация прироста эстриола в эти же сроки (рис.3,4). Содержание кортизола в I подгруппе до 36 недель практически не отличалось от нормы, но в 37-38 и 39-40 недель было сниженным (рис.5).

Во II подгруппе на фоне более выраженного снижения содержания эстриола отмечено повышение уровня прогестерона и кортизола относительно контрольной группы, однако, оно сопровождалось падением их уровня в крови матери после 38 недель беременности (табл. №№ 3,4,5).

Развитие тяжелой формы гестоза характеризовалось выраженным снижением концентрации эстриола и прогестерона во все исследуемые сроки (рис.3,4). Уровень кортизола был незначительно ниже нормы до 36 недель беременности, после чего наблюдалось резкое падение его концентрации (рис.5).

Повышенное содержание кортизола в крови женщин II подгруппы, вероятно может свидетельствовать о напряжении адаптационнных механизмов, направленных на поддержание гомеостаза в системе. Снижение уровня этого гормона в III подгруппе, вероятно, связано с истощением функции коры надпочечников как матери, так и, в основном, плода, что значительно снижает его адаптационные возможности в интра-и неонатальном периоде. Убедительным доказательством этого является выявленное снижение уровня кортизола в крови матерей, родивших детей в состоянии средней тяжести и в тяжелом состоянии. Концентрация кортизола составила соответственно 961.04+-59.85 нмоль/л и 912.77+-34.25 нмоль/л (табл.2).

Фето-плацентарная недостаточность характеризовалась низким уровнем содержания гормонов (табл. №2). Анализ данных, полученных при сравнительном изучении гормонального статуса беременных с «чистой» и сочетанной формой гестоза (рис.3,4,5) показал, что наиболее низкие концентрации гормонов наблюдались при сочетанной форме гестоза при развитии заболевания на фоне хронического пиелонефрита и гипертонической болезни 1-П степени (табл.№3). Полученные данные позволяют сделать вывод о более неблагоприятном влиянии сочетанных гестозов на функцию фето-плацентарной системы.

Выраженное влияние на уровень в крови исследуемых гормонов оказывала длительность заболевания. По мере увеличения длительности гестоза снижалось содержание всех гормонов сыворотки крови (табл. №4). Таким образом, длительность течения гестоза является одним из основных критериев, определяющих степень его тяжести.

Следовательно, осложнение беременности гестозом приводит к развитию гормонального дисбаланса в системе мать - плацента - плод, степень выраженности которого зависит от тяжести заболевани.

Легкая степень -ж-

Средняя степень ■ -□-Тяжелая степень --х- -

Чистая форма Соиетанная форма

Легкая степень -ж-

Средняя степень □ ■

Тяжелая степень х-

Чистая форма Аг-

Соиетанная форма

1250 1200 -1150 1100 Н 1050 1000 950 900 -850 -800 ? 50

Легкая степень -ж-

Средняя степень

Тяжелая степень -х-

Чистая форма Соиетанная форма

Таблица 2

физиологическая беременность хроническ. внутриутробная гипоксия внутриутробная гипотро фия плода морфо-функ- циональная незрелость

эстриол 121.76+13.07 66.90+7.68* 77.11+13.47* 67.15+9.56*

прогестерон 197.91+20.26 151.94+27.79 129.29+16.49* 144.85+19.34

корти-зол 1081.08+89.05 916.12+34.25 923.12+78.53 1120.31+102.11

р<0.05 при сравнении с контрольной группой

Таблица 3

неосложненная беременность II 121.76+13.07 197.91+20.26 1081.08+89.05

гестоз на фоне ВСД по гипертоническому типу 14 79.02+7.64* 157.54+13.39 914.36+54.10

гестоз на фоне гипертонической болезни 1-11 степени б 71.68+13.95* 132.51+14.21* 1239.10+160.60

гестоз на фоне хронического пиелонефрита II 62.84+6.62* 104.46+11.31* 965.09+53.06

р<0.05 при сравнении с контрольной группой

Таблица 4

п эстриол нмоль/л прогестерон нмоль/л кортизол нмоль/л

20-24 нед 15 68.84+-8.14 133.35+-19.69 904.42+-80.72

25-30 нед 14 71.78+-9.45 148.35+-18.92 953.45+-60.14

30-35 нед 15 76.39+-8.80 196.04+-36.87 962.16+-65.37

36-40 нед 12 98.57+-13.05 229.16+-39.59 988.57+-61.65

Р1-Р2>0.05 р|-р2>0.05 р!-р2>0.05 Р2-Рз>0.05 р1-рз<0.05 р]-рз>0.05 Р|-Р3>0.05 Р2-Рз>0.05 р]-р4>0.05 Р1~Р4<0.05 РГР4<0.05 Р2-Р4<0.05

Изменение процессов пероксидации в плаценте и антиоксидантной активности крови. Было обследовано 40 беременных в сроке 39-40 недель. Из них II с неосложненной беременностью (контрольная группа) и 29 с гестозом различной степени тяжести (основная группа). Все женщины основной группы были разделены на две подгруппы: в I вошли 13 беременных с гестозом легкой степени, во II - 16 со средней и тяжелой формой гестоза. О состоянии процессов ПОЛ в плаценте судили по содержанию в ткани плаценты малонового диальдегида (МДА). В качестве показателя, характеризующего состояние антиоксидантной системы крови в сыворотке определяли соотношение церулоплазмин/трансферин.

В контрольной группе содержание МДА в плаценте составило 0.520+-0.30 нмоль/мг белка. В группе беременных с гестозом уровень содержания МДА в плаценте увеличивался по мере нарастания тяжести гестоза. В I подгруппе концентрация МДА в гомогенате плаценты составила 0.564+0.052 нмоль/мг белка (р>0.05), во II подгруппе 0.648+-0.38 нмоль/мг белка (р<0.05). Полученные результаты свидетельствуют об активации процессов ПОЛ непосредственно

в ткани плаценты при гестозах. Кроме того, процесс активации ПОЛ в плаценте по мере нарастания тяжести гестоза сопровождается повышением уровня холестерина в крови и прогрессивным снижением концентрации эстриола, обладающего антиоксидантной активностью.

Наряду с возрастанием интенсивности ПОЛ в плаценте были выявлены изменения в антиоксидантной системе крови. В контрольной группе амплитуда ЗПР-сигнала церулоплазмина составила в среднем 3.57+-0.37 см. Развитие гестоза легкой степени (I подгруппа) сопровождалось увеличением амплитуды сигнала до 5.00+-0.27 см (на 29%) (р<0.05). Во II подгруппе содержание церулоплазмина в сыворотке крови снижалось, о чем свидетельствует низкая средняя величина амплитуды ЗПР-сигнала - 2.43+-0.46 см (на 61.4%) (р<0.05). Средняя величина спектра амплитуды ЗПР в контрольной группе для трансферина составила 5.01+-0.61 см. В I подгруппе было отмечено повышенное содержание трансферина, что проявлялось в увеличении средней величины амплитуды ЗПР-спектра до 7.00+-0.87 см (на 29%) относительно контрольной группы (р>0.05). По мере нарастания тяжести гестоза содержание трансферина в крови снижалось. Во II подгруппе средняя величина амплитуды ЗПР-спектра была 4.08+-0.79 (на 42% меньше, чем в I подгруппе) (р<0.05). Соотношение церулоплазмин/трансферин для контрольной группы составило 0.71+-0.27. При гестозе легкой степени (I подгруппа) наблюдалось повышение этого соотношения до 0.95+-0.16 (р>0.05), что свидетельствует об активации антиоксидантной системы крови. Во II подгруппе данное соотношение было сниженным - 0.60+-0.03 (р<0.05), причем происходило, в основном, за счет уменьшения содержания церулоплазмина. Интенсификация процессов ПОЛ в плаценте при легкой степени заболевания сопровождается активацией антиоксидантной системы крови, при средней и тяжелой - снижением ее активности, что неблагоприятно сказывается на состоянии клеточных мембран структурных элементов трофобласта и хориона.

Таким образом, одной из основных причин развития плацентарной недостаточности является дисбаланс про- и антиоксидантной систем. Так, развитие хронической внутриутробной гипоксии плода и внутриутробной гипотрофии в наблюдаемых случаях сопровождалось активацией процессов ПОЛ в плаценте - содержание МДА соответственно 0.629+0.033 (р<0.05) и 0.537+-0.093 нмоль/мг белка (р>0.05). При

хронической внутриутробной гипоксии плода соотношение церулоплазмин/трансферин было несколько выше нормального значения - 0.86+-0.10 (р>0.05). Развитие же внутриутробной гипотрофии сопровождалось снижением антиоксидантной активности крови - 0.61+-0.08 (р>0.05).

При сравнительной оценке данных, полученных для «чистой» и сочетанной форм гестозов установлено, что для сочетанных форм характерно повышенное содержание в плаценте МДА и более низкая величина соотношения церулоплазмин/трансферин, соответственно 0.608+-0.045 нмоль/мг белка, 0.69+-0.15 (р>0.05) и 0.58+-0.033 нмоль/мг белка, 0.98+-0.16 (р>0.05). Это подтверждает ранее опубликованные данные о более выраженном патологическом влиянии сочетанных форм гестоза на состояние фето-плацентарного комплекса.

Выявлена зависимость между длительностью заболевания и степенью активности про- и антиоксидантных систем. При появлении первых симптомов гестоза в 36-40 недель повышение содержания МДА в плаценте было незначительным - 0.570+-0.044 нмоль/мг белка и сопровождалось повышением активности антиоксидантных систем крови (соотношение церулоплазмин/трансферин - 1.098+-0.24). Увеличение длительности заболевания сопровождалось более выраженной интенсификацией процессов ПОЛ и истощением антиоксидантной активности крови. Так, при начале гестоза в 20-24 недели содержание МДА в плаценте составило 0.635+-0.05 нмоль/мг белка (р<0.05). Следовательно, длительность течения гестоза является одним из самых важных показателей степени его тяжести. Таким образом, развитие гестоза сопровождается интенсификацией реакций ПОЛ в плаценте и снижение антиоксидантной активности крови при средней и тяжелой форме гестоза. Нарушение во взаимодействии про- и антиоксидантных систем приводит к нарушению функций клеточных мембран структурных элементов трофобласта, нарушение синтеза гормонов и белков, способствуя развитию фето-плацентарной недостаточности.

1. Возникновение гестоза во время беременности вызывает изменение фето-плацентарного гомеостаза, выражающееся в нарушении синтеза ТБГ, гормональной функции плаценты, взаимоотношений про- и антиоксидантных систем.

2. При физиологической беременности содержание ТБГ в сыворотке крови прогрессивно нарастает до 36 недель беременности в 4.28 раза, после чего происходит снижение его уровня к сроку родов; темпы прироста концентрации ТБГ за две недели в I и II триместре составляют 10.0-33.4%, в III триместре 4.7-6.2%.

3. Возникновение при беременности гестоза сопровождается снижением уровня сывороточного ТБГ и нарушением характера его динамики. Выявленные нарушения находятся в прямой зависимости от степени тяжести гестоза. Развитие гестоза на фоне экстрагенитальной патологии характеризуется более низким уровнем ТБГ, чем при «чистой» форме.

4. Развитие фето-плацентарной недостаточности при гестозах сопровождается снижением содержания ТБГ в сыворотке крови на 22.7-30.06% по сравнению с нормой, что позволяет использовать определение уровня сывороточного ТБГ в комплексной диагностике состояния фето-плацентарной недостаточности при гестозах.

5. Развитие гестоза приводит к снижению выработки фето-плацентарным комплексом эстриола и прогестерона, степень выраженности которого прямопропорциональна тяжести заболевания. Наиболее выраженные изменения гормонального статуса характерны для тяжелой степени гестоза и его сочетанных форм.

6. При средней тяжести гестоза наблюдается повышение уровня кортизола по сравнению снормой с «пиком» в 36 недель беременности. При тяжелой форме происходит снижение уровня кортизола в динамике, что объясняется истощением функциональных возможностей фето-плацентарного комплекса.

7. Легкая форма гестоза характеризуется активацией ПОЛ в плаценте, при этом содержание МДА в гомогенате плаценты возрастает на 8.46%; и компенсаторным повышением антиоксидантной активности крови (отношение церулоплазмин/трансферин возрастает на 33.8%).

8. При средней и тяжелой форме заболевания, на фоне более выраженной интенсификации ПОЛ и повышения содержания МДА в плаценте на 24.6% отмечается снижение антиоксидантной активности крови, о чем свидетельствует снижение соотношения церулоплазмин/трансферин на 15.5%. Возникновение гестоза на фоне экстрагенитальной патологии характеризуется более высокой интенсивностью ПОЛ в плаценте и низкой антиоксидантной активностью крови, чем его «чистая» форма.

9. Недостаточность функции фето-плацентарного комплекса при гестозах сопровождается повышением содержания продуктов ПОЛ в плаценте на 3.27-20.96%, что свидетельствует об определенной роли активации ПОЛ патогенезе фето-плацентарной недостаточности.

1. Определение сывороточного уровня ТБГ может служить дополнительным диагностическим тестом для определения содержания ТБГ при доношенной беременности на 20-30% может свидетельствовать ■ о развитии фето-плацентарной недостаточности и неблагоприятном исходе родов для плода.

2. Определение содержания в плаценте малонового диальдегида, уровень которого при развитии плацентарной недостаточности возрастает почти на 20%, можно использовать для ретроспективной диагностики состояния плаценты при гестозах.

3. Для определения состояния фето-плацентарной системы при гестозах информативным является определение в сыворотке крови матери эстриола, прогестерона и кортизола. Синхронное снижение их уровня в сыворотке крови свидетельствует об истощении функции и развитии недостаточности фето-плацентарной системы.

№7, с.18-22 (соавт. Побединский Н.М., Разманихина Н.И., Венгеров Ю.Ю., Старовойтова Т.А.)

3. Изменение некоторых биохимических и биофизических показателей при беременности, осложненной гестозом (соавт. Побединский Н.М., Разманихина Н.И., Острахович Е.А., Соодаева С.К.) - принята к печати в журнал «Акушерство и гинекология».

1. Увеличение в крови (в сыворотке) [фермента] называется (гипер/фермент/емия). Если этот фермент в норме находится внутри клеток, то гипер/фермент/емия является чаще всего признаком разрушения клеток. Наличие фермента в крови определяют по скорости химической реакции, катализируемой этим ферментом – при добавлении в исследуемую сыворотку субстрата этого фермента («в пробирке»). Другими словами, о [фермента] в сыворотке судят по активности фермента.

В некоторых случаях для постановки диагноза нужно определение активности не одного фермента, а двух.

15.Глюкозурия, её причины и диагностическое значение.

В норме глюкозы в моче очень мало (< 0,5 г/сутки, или < 0,16 г/л), что не определяется обычными методами. Глюкозурией считают наличие в моче глюкозы , которая обнаруживается стандартным специфическим тестом. Глюкозурия развивается в тех случаях, когда содержание глюкозы в плазме крови и, следовательно, в клубочковом фильтрате значительно превосходит реабсорбционную мощность почечных канальцев.

Это бывает при любом повышении глюкозы крови , особенно в результате быстрого всасывания глюкозы в кишечнике (постгастроэктомический демпинг-синдром, нормальная беременность); при эндокринных заболеваниях (СД, тиреотоксикоз, гигантизм, акромегалия, синдром Кушинга, гиперплазия коры надпочечников); при большой травме, параличе, инфаркте миокарда, пероральном приеме ГКС, ожогах, инфекции, феохромоцитоме.

Почечная глюкозурия наблюдается при повреждении и увеличении проницаемости почечных канальцев, тубулопатиях (болезнь Фанкони), что сопровождается увеличением в моче уратов, белка, аминокислот, бикарбонатов, фосфатов, кальция, калия. Глюкозурия имеется при почечном диабете (мутация переносчика моносахаридов и снижение реабсорбции), вторичной ренальной глюкозурии, при хронических заболеваниях почек. У больных сахарным диабетом концентрацияглюкозы в моче может колебаться от 0,5 до 12%. Исчезновение глюкозурии у больных, длительно страдающих сахарным диабетом, является следствием присоединившейся почечной недостаточности.

Глюкозурию могут симулировать лактозурия у кормящих грудью женщин, фруктозурия и галактозурия при наследственных заболеваниях углеводного обмена. Глюкозурия возникает при отравлении морфином, стрихнином, хлороформом, фосфором.

16. Значение определения Са 2+ и фосфата в сыворотке крови.

Норма кальция крови 2,1 -2,6 ммоль/л. Уровень выше 3,5-3,75 опасен для жизни.Возможны криз, внезапная остановка сердца.

Норма фосфата 0,8-1 ,4 ммоль/л.

1. Значение определения К А Л Ь Ц И Я и Ф О С Ф А Т А в сыворотке крови.

Изменения [кальция] и [фосфата] в сыворотке крови: во-первых, являются следствием определенных нарушений и поэтому указывают на наличие этих нарушений. Во-вторых, могут стать причиной определенных нарушений и поэтому указывают на риск развития этих нарушений.

Причины изменений концентраций кальция и фосфата: 1) неправильное питание (избыточное или недостаточное поступление кальция и фосфата и пищей), 2) нарушения регуляции и [фосфата], обусловленные нарушениями в выработке гормонов, регулирующих и [фосфата].

При недостаточном поступлении кальция и фосфата с пищей и [фосфата] в плазме может снижаться, но не значительно, так как кальций и фосфат поступают в плазму из костей (если в плазме снижается и [фосфата] – но это происходит под действием гормонов кальцитриола и паратирина и именно их дефицит может привести к снижению

17. биохимическая диагностика панкреатита.

Биохимический анализ крови - выявление повышенного уровня ферментов амилазы, Объяснения: амилаза вырабатывается ПЖЖ и слюнными железами, из которых поступает по протокам в пищеварительный тракт для пищеварения (для переваривания крахмала пищи: расщепления крахмала до мальтозы)) – амилаза ПЖЖ поступает в ДПК, а амилаза слюнных желез поступает в ротовую полость. В крови амилаза не должна находиться, и наличие амилазы в крови является результатом повреждения СЖ или ПЖЖ. В мочу может попасть только амилаза ПЖЖ (если она есть в крови), а амилаза СЖ попасть в мочу не может. Липаза вырабатывается в ПЖЖ, но не в СЖ. У человека речь идет об α -амилазе. β-амилазы у человека нет, так как это амилаза, которая позволила бы человеку питаться бумагой так же, как хлебом – эта амилаза расщепляет β-гликозидные связи в целлюлозе. α-амилаза катализирует отщепление мальтозы от крахмала или гликогена пищи

Похожая информация.

Углеводсодержащие белки

Выделяют два подкласса белков, содержащих углеводы: протеогликаны и гликопротеины. Между этими подклассами имеются существенные отличия:

Для гликопротеинов характерна структурная роль

Способы присоединения углевода к белку.

Гликопротеины - белки, содержащие в качестве простетической группы небольшое количество углеводов (до 15 %), присоединенных к аминокислотным радикалам ковалентными связями. В составе углеводной части определяются гексозы (галактоза, манноза, редко глюкоза), пентозы (ксилоза, арабиноза), дезоксисахара (фукоза, рамноза), аминосахара (ацетилгалактозамин, ацетилглюкозамин), нейраминовая кислота и ее уксуснокислые эфиры (сиаловые кислоты). Они присоединены либо N-гликозидной связью к амидному азоту аспарагина, либо О-гликозидной связью к гидроксигруппе остатка серина, треонина, гидроксилизина. Большинство этих белков обладает слабовыраженными кислыми свойствами. В группе гликопротеинов выделяют серомукоиды (серо­гликоиды), обладающие выраженными кислыми свойствами и растворимых в хлорной, трихлоруксусной и сульфосалициловой кислотах. Эта фракция, составляя 1 % всех белков сыворотки, включает 12 % всех углеводов плазмы.

Функции гликопротеидов

Схема строения белка-рецептора.

• Структурная - клеточная стенка бактерий, костный матрикс, например, коллаген, эластин;
• Защитная - например, антитела, интерферон, факторы свертывания крови (протромбин, фибриноген);
• Рецепторная - присоединение эффектора приводит к изменению конформации белка-рецептора, что вызывает внутриклеточный ответ;
• Гормональная - гонадотропный, адренокортикотропный и тиреотропный гормоны;
• Ферментативная - холинэстераза, нуклеаза;
• Транспортная - перенос веществ в крови и через мембраны, например, трансферрин, транскортин, альбумин, Na + ,К + -АТФаза.

Протеогликаны

Другая группа гликоконъюгатов - протеогликаны - характеризуется наличием крупных полисахаридов, состоящих из повторяющихся дисахаридных остатков. Это гидрофильные соединения, в состав которых входит 20‑80 % углеводов. Углеводные компоненты протеогликанов называют гликозаминогликанами. Выделяют 7 типов гликозаминогликанов, из них 5 типов содержат в своем составе глюкуроновую кислоту (к ним относятся гиалуроновая кислота, хондроитин-4‑сульфат и хондроитин-6‑сульфат, гепарин и гепарансульфат), шестой тип (дерматансульфат) содержит идуроновую (галактуроновую) кислоту, седьмой (кератансульфат) - галактозу. Сиаловые кислоты, манноза, ксилоза присутствуют в минимальном количестве. Протеогликаны имеют сильно выраженные кислотные свойства благодаря наличию большого числа карбоксильных групп и остатков серной кислоты. Дисахариды включают в себя какую-либо уроновую кислоту и аминосахар. Многократно дублируясь, дисахариды образуют олиго- и полисахаридные цепи - гликаны. Для углеводной части встречаются другие названия - кислые гетерополисахариды (так как имеют много кислотных групп), гликозаминогликаны (содержат аминогруппы). Избыток анионных групп (сульфатных, карбоксильных) придает молекулам гликозаминогликанов высокий отрицательный заряд.

Строение гиалуроновой кислоты и хондроитинсульфата.

Основными представителями структурных гликозаминогликанов являются гиалуроновая кислота, хондроитинсульфаты, кератансульфаты и дерматансульфаты. Эти молекулы входят в состав протеогликанов, функцией которых является заполнение межклеточного пространства и удержание здесь воды, также они выступают как смазочный и структурный компонент суставов и других тканевых структур.

Углеводная часть, аналогично с гликопротеинами, связывается с белком через остатки серина и аспарагина.

Схема строения протеогликанов межклеточного вещества.

Функции протеогликанов

По функции структурные протеогликаны значимы для межклеточного пространства, особенно соединительной ткани, в которое погружены коллагеновые волокна. При помощи электронной микроскопии выяснено, что они имеют древовидную структуру. Молекулы гликанов весьма гидрофильны, создают сетчатый желеподобный матрикс и заполняют пространство между клетками , являясь преградой для крупных молекул и микроорганизмов.

Еще одним представителем протеогликанов является гепарин, включающий несколько сульфатированных цепей гетерополисахарида, связанного с белковым ядром через остатки серина. В крови гепарин связывается с антитромбином III, образуя комплекс, блокирующий факторы свертывания крови IIа, IХа, Ха, XIa и ХIIа, что применяется для профилактики тромбозов у больных различного профиля. В настоящее время используются препараты низкомолекулярных гепаринов и нефракционированных гепаринов, обладающие лучшими характеристиками.

Также функцией гепарина является активирующее влияние на активность фермента липопротеинлипазы, участвующего в метаболизме транспортных форм липидов в крови (хиломикроны и липопротеины очень низкой плотности). Как следствие, количество липидов в крови снижается.

Методы исследования содержания углеводсодержащих белков

При исследовании содержания углеводсодержащих белков возможно использование нескольких методических подходов:

Различие в окраске после проведения карбазоловой и орциновой реакций позволяет судить об относительном содержании дерматансульфата в пробе. Для чистого образца дерматансульфата отношение содержания гликозаминогликанов по карбазоловой реакции к их концентрации, определенной по орциновой реакции, равняется 0,67. При наличии других гликозаминогликанов (кроме кератансульфата) коэффициент возрастает.

В качестве унифицированных утверждены резорциновый метод определения концентрации сиаловых кислот и орциновый метод определения всех гексоз, входящих в состав гликопротеинов, и гексоз, связанных с серогликоидами.

Резорциновый метод определения концентрации сиаловых кислот (по Свеннерхольму)

Принцип

При нагревании гликопротеинов плазмы с трихлоруксусной кислотой отщепляются сиаловые кислоты, которые в свою очередь гидролизуются с образованием нейраминовой кислоты. Резорцин в присутствии солей меди в солянокислой среде дает с нейраминовой кислотой синее окрашивание.

Нормальные величины

Концентрация сиаловых кислот в крови возрастает при различных воспалительных процессах (эндокардите, остеомиелите), при туберкулезе, лейкемии, лимфогранулематозе, нефрозе, резко повышается при опухоли головного мозга, инфаркте миокарда, увеличивается при поражении паренхимы печени, коллагенозах, при других процессах, протекающих с деструкцией соединительной ткани.

Снижение сывороточного уровня сиаловых кислот отмечается у больных с пернициозной анемией, гемохроматозом, болезнью Вильсона и дегенеративными процессами в ЦНС.

Определение содержания серомукоидов и общего количества гликопротеинов орциновым методом

Принцип

Гликопротеины осаждают вместе с белками сыворотки или плазмы крови спиртом, осадок отмывают, растворяют в щелочи и после гидролиза серной кислотой определяют концентрацию гексоз по реакции с орцином, что соответствует содержанию гликопротеинов.

Для определения серомукоидов белки осаждают хлорной кислотой, при этом серомукоиды не осаждаются. Затем из надосадочной жидкости осаждают серомукоиды при помощи фосфорновольфрамовой кислоты, осадок отмывают и после растворения его в щелочи определяют уровень гексоз.

Нормальные величины

Клинико‑диагностическое значение

Количество гексоз гликопротеинов увеличивается при разнообразных воспалительных процессах: туберкулезе, плеврите, пневмонии, остром ревматизме, гломерулонефрите, при диабете, инфаркте миокарда, подагре, злокачественных новообразованиях. Особое значение определение концентрации гликопротеинов имеет при вяло текущих заболеваниях, при этом возрастание активности свидетельствует об активации процесса, хотя клинические симптомы еще могут не проявляться.

МУЗ «ПЕРВАЯ ГОРОДСКАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ БОЛЬНИЦА СКОРОЙ МЕДИЦИНСКОЙ ПОМОЩИ»

СЕВЕРНЫЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

КУРС КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

Общий белок, его значение и методы определения

Выполнила врач-интерн:

Гернет М.М.

г. Архангельск2008 г.

Введение

Классификация

Белки плазмы крови

Альбумины

Глобулины

Клинико-диагностическое значение

Гипопротеинемия

Гиперпротеинемия

Методы определения общего белка в сыворотке крови

Список использованной литературы

Введение

Белки – высокомолекулярные органические азотсодержащие соединения, состоящие более чем из 20 видов альфа-аминокислот. Условной границей между крупными полипептидами и белками служит молекулярная масса 8000-10000. Плазменные белки синтезируются преимущественно в печени, клетках плазмы, лимфатических узлах, селезенке и костном мозге.

Плазма крови человека содержит более 100 различных белков, различающихся по происхождению и функциям. Из 9-10% сухого остатка плазмы крови на долю белков приходится 6.5-8.5%.

Классификация

· Простые (протеины) (содержат только аминокислоты)

· Сложные (протеиды) (аминокислоты и неаминокислотные компоненты: гем, производные витаминов, липиды или углеводы)

· Фибриллярные (составляющие многие плотные ткани)

· Глобулярные (альбумины (4-5%), глобулины (2-3%), фибриноген (0.2-0.4%)

Существуют следующие функциональные классы белков:

Транспортные белки (трансферрин)

Белки острой фазы (С-реактивный белок)

Белки неострой фазы (Альбумин, трансферрин)

Комплемент и свертывающие факторы (комплемент С4, фактор VIII)

Ферменты (Амилаза)

Антифермент (Антитромбин III)

Протеогормоны (Инсулин)

Иммуноглобулины (IgG)

Белки, чьи функции недостаточно изучены (альфа-гликопротеиновая кислота)

Физиологическая функция белков плазмы состоит в поддержании коллоидно-осмотического давления, буферной емкости плазмы, в некоторых случаях – депонировании (хранении) молекул липидов, продуктов метаболизма, гормонов, лекарственных веществ и микроэлементов. Некоторые белки плазмы выполняют ферментативную функцию, иммуноглобулины осуществляют гуморальный иммунитет. Компоненты комплемента и С-реактивный белок важны для осуществления неспецифической резистентности, особенно в случае бактериальных инфекций. Баланс между факторами и ингибиторами свертывания обеспечивают жидкое состояние крови в норме и быстрое свертывание в случае травмы

Белки плазмы крови

Альбумины:

Нормируемое значение 56.5 – 66.8 (На альбумин в сыворотке крови приходится приблизительно 60% общего белка. Альбумины синтезируются в печени (примерно 15г/сут), время их полураспада составляет примерно 17 дней. Онкотическое давление плазмы на 65-80 % обусловлено альбумином. Альбумины выполняют важную функцию транспортировки многих биологически активных веществ, в частности гормонов. Они способны связываться с ХС, билирубином. Значительная часть кальция в крови также связана с альбумином. Альбумины способны соединяться с различными ЛС.

Возможны как качественные, так и количественные изменения альбуминов плазмы крови. Качественные изменения альбуминов очень редки из-за гомогенного состава этой белковой фракции; количественные изменения проявляются гипер- и гипоальбуминемией.

Гиперальбуминемию наблюдают при дегидратации в случаях тяжелых травм, при обширных ожогах, холере.

Гипоальбуминемии бывают первичные (у новорожденных детей в результате незрелости печеночных клеток) и вторичные, обусловленные различными патологическими состояниями, аналогичными тем, что вызывают гипопротеинемию. В понижении концентрации альбуминов может также играть роль гемодилюция, например при беременности. Снижение содержания альбуминов ниже 22-24 г/л сопровождается развитием отека легких.)

Глобулины:

· Альфа 1 - 3.5 - 6.0 (основные компоненты данной фракции включают α 1 –антитрипсин, α 1 – липопротеид, кислый α 1 – гликопротеид) (Изменение фракции α 1 – глобулинов наблюдают при острых, подострых, обострении хронических воспалительных процессов; поражении печени; всех процессах тканевого распада или клеточной пролиферации. Снижение фракции α 1 – глобулинов наблюдают при дефиците α 1 – антитрипсина, гипо - α 1 – липопротеидемии.)

· Альфа 2 - 6.9 – 10.5 (фракция содержит α 2 – макроглобулин, гаптоглобин, алипопротеины А, В (апо-А, апо-В), С, церулоплазмин) (увеличение фракции α 2 – глобулинов наблюдают при всех видах острых воспалительных процессах, особенно с выраженным экссудативным и гнойным характером (пневмонии, эмпиема плевры, другие виды гнойных процессов); заболеваниях, связанных с вовлечением в патологический процесс соединительной ткани (коллагенозы, аутоиммунные заболевания, ревматические заболевания); злокачественных опухолях; в стадии восстановления после термических ожогов; нефротическом синдроме; гемолизе крови в пробирке. Снижение фракции наблюдают при сахарном диабете, панкреатитах (иногда), врожденной желтухе механического происхождения у новорожденных, токсических гепатитах. К α 2 – глобулинам относится основная масса белков острой фазы. Увеличение их содержания отражает интенсивность стрессорной реакции и воспалительных процессов при перечисленных видах патологии.

· Бета - 7.3 – 13.0 (β-фракция содержит трансферрин, гемопексин, компоненты комплемента, иммуноглобулины и липопротеины) (увеличение фракции бета-глобулинов выявляют при первичных и вторичных гиперлипопротеинемиях, заболеваниях печени, нефротическом синдроме, кровоточащей язве желудка, гипотиреозе. Понижение величины содержания бета-глобулинов выявляют при гопо-бета-липопротеинемии.

· Гамма - 12.8 – 19.0 (γ-фракция содержит Ig (IgG, IgA, IgM IgD, IgE), поэтому повышение содержания γ-глобулинов отмечают при реакции системы иммунитета, когда происходит выработка AT и аутоантител: при вирусных и бактериальных инфекциях, воспалении, коллагенозах, деструкции тканей и ожогах. Значительная гипергаммаглобулинемия, отражая активность воспалительного процесса, характерна для хронически активных гепатитов и циррозов печени. Повышение фракции γ - глобулинов наблюдают у 88-92% больных хроническим активным гепатитом (причем у 60-65% больных оно весьма выраженное - до 26 г/л и выше). Почти такие же изменения отмечают у больных при высокоактивном и далеки зашедшем циррозе печени, при этом нередко содержание γ-глобулином превышает содержание альбуминов, что считают плохим прогностическим признаком.

При определённых заболеваниях возможен повышенный синтез белком, попадающих в фракцию γ-глобулинов, и в крови появляются патологические протеины - парапротеины, которые выявляют при электрофорезе. Для уточнения характера этих изменений необходим иммуноэлектрофорез. Подобные изменения отмечают при миеломной болезни, болезни Вальденстрема.

Уменьшение содержания γ-глобулинов бывает первичным и вторичным.

Различают три основных вида первичных гипогаммаглобулинемий: физиологическую (у детей в возрасте 3-5 мес), врождённую и идиопатическую. Причинами вторичных гипогаммаглобулинемий могут быть многочисленные заболевания и состояния, приводящие к истощению иммунной системы.

Сопоставление направленности изменении содержания альбуминов и глобулинов с изменениями общего содержания белка даёт основание для заключения, что гиперпротеинемия чаще связана с гиперглобулинемиями, в то время как гипопротеинемия обычно обусловлена гипоальбуминемией. В прошлом широко применяли вычисление альбумин-глобулинового коэффициента, то есть отношения величины фракции альбуминов к величине фракции глобулинов. В норме этот показатель составляет 2,5-3,5. У больных хроническими гепатитами и циррозами печени этот коэффициент снижается до 1,5 и даже до 1 за счёт снижения содержания альбумина и повышения фракции глобулинов. В последние годы всё больше внимания уделяют определению содержания преальбуминов, особенно у тяжёлых реанимационных больных, находящихся на парентеральном питании. Снижение концентрации преальбуминов - ранний и чувствительный тест белковой недостаточности в организме больного.)

Коэффициент А\Г обычно используется как индекс соотношения альбумина и глобулинов.

Изменения этого коэффициента могут наблюдаться при циррозе печени, гломерулонефрите, нефротическом синдроме, остром гепатите, системной красной волчанке.

Концентрация белков в плазме крови зависит от соотношения между скоростью их синтеза и выведения из организма, а также объема распределения.

Многие белки образуются в печени, плазматические клетки и лимфоциты синтезируют иммуноглобулины, макрофаги – белки системы комплимента. Пассивная потеря белков с низкой молекулярной массой происходит через почечные клубочки и стенку кишечника. Часть из этих белков подвергается реабсорбции либо захватывается и расщепляется в слизистой оболочке кишечника. Большинство белков плазмы после их захвата путем пиноцитоза катаболизируется в клетках эндотелия капилляров или мононуклеарных фагоцитов.

Физиологические роли белков крови многочисленны, основные из них следующие:

· Поддерживают коллоидно-онкотическое давление, сохраняя объем крови, связывая воду и задерживая ее, не позволяя выходить из кровеносного русла;

· Принимают участие в процессах свертывания крови;

· Поддерживают постоянство Рн крови, формируя одну из буферных систем крови;

· Соединяясь с рядом веществ (ХС, билирубин и др.), а также с ЛС, доставляют их в ткани.

· Поддерживают нормальный уровень катионов в крови путем образования с ними недиализируемых соединений (например, 40-50%кальция сыворотки связано с белками; значительная часть железа, меди, магния и других микроэлементов также связано с белками);

· Играют важнейшую роль в иммунных процессах;

· Служат резервом аминокислот;

· Выполняют регулирующую функцию (гормоны, ферменты и другие биологически активные белковые вещества).

Клинико-диагностическое значение

Нормопротеинемия – нормальное содержание общего белка

Гипопротеинемия – пониженное содержание общего белка

Гиперпротеинемия – повышенное содержание белка

Гипопротеинемия

1. Недостаточное поступления белка пищи, наблюдаемое обычно при недоедании, голодании, опухоли, сужении пищевода, нарушении функции желудочно-кишечного тракта (вследствие ухудшения переваривания и всасывания белковых компонентов пищевых продуктов), например, при продолжительных воспалительных процессах кишечника.

По мнению А.А.Покровского, даже несбалансированный аминокислотный состав пищи может иногда приводить к гипопротеинемии.

Для обеспечения нормальных процессов жизнедеятельности организм утилизирует альбуминовую фракцию белков плазмы крови. При усиленном расходовании альбуминов (в основном обусловливающих онкотическое давление крови) развиваются так называемые онкотические или голодные отеки. Вообще говоря, всякое уменьшение содержания белка в плазме крови ниже 5 г% часто сопровождается гипопротеинемическими отеками тканей.

2. Понижение процессов биосинтеза белка (хронические паренхиматозные гепатиты, острые и хронические заболевания, длительные нагноительные процессы, злокачественные новообразования, тяжелые тиреотоксикозы и т.д.).

3. Потеря белка организмом при острых и хронических кровотечениях, при резко увеличенной проницаемости капиллярных стенок (при токсическом их поражении, когда белки крови выходят в ткани), при кровоизлияниях, образовании обширных экссудатов, выпотов в серозные полости, отеках.

Выход белков(главным образом альбуминов)из русла крови происходит при нарушении почечного фильтра вследствие органических заболеваний почек (особенно нефрозах и амилоидозах), при которых белок почти всегда обнаруживается в моче, а также при ожогах.

4. Дефектопротеинемии (альбуминемия) – врожденное отсутствие или недостаточное содержание церулоплазмина в плазме крови при болезни Вильсона.

5. У женщин в период лактации и последних месяцев беременности.

6. Нефротический синдром

7. Квашиоркор (острая белковая недостаточность)

8. Ретенционный солевой синдром

Гиперпротеинемия

1. Серьезное обезвоживание

2. При сгущении крови из-за незначительных потерь жидкости, что бывает при профузных поносах, усиленном потоотделении, неукротимой рвоте, несахарном диабете, при холере, непроходимости кишечника, генерализованном перитоните, тяжелых ожогах, лишении воды.

3. При хроническом полиартрите и некоторых и некоторых хронических воспалительных процессах.

4. Стойкая гиперпротеинемия до 12 г% и выше отмечается при миеломной болезни (плазмацитоме), макроглобулинемии Вандельстрема, при которых в плоских костях черепа появляются дополнительные очаг и образования «ненормальных», патологических белков – парапротеинов.

Гипопротеинемия связана почти всегда с гипоальбуминемией, а гиперпротеинемия – с гиперглобулинемией.

Гипоальбуминемию организм компенсирует гиперглобулинемией (даже если нет раздражения ретикуло-эндотелиальной системы) для того, чтобы сохранить уровень коллоидно-осмотического давления. Напротив, увеличение глобулинов компенсируется гипоальбуминемией.

Важное диагностическое значение имеет выяснение количественных взаимоотношений между отдельными фракциями сыворотки крови. Их изучение позволяет произвести дифференциацию заболеваний даже тогда, когда содержание общего белка в сыворотке оказывается неизменным.

Методы определения общего белка в сыворотке крови

Референтные величины концентрации общего белка в сыворотке крови – 65-85 г/л

1. Азотметрические

2. Определение удельного веса сыворотки

3. Весовые (гравиметрические), когда белки крови осаждают, высушивают до постоянного веса и взвешивают на аналитических весах.

4. Рефрактометрические

5. Колориметрические

6. Нефлометрические

7. Поляриметрические

8. Спектрофометрические

1. Рефрактометр ИРФ – 454 Б2М

предназначен для определения белка в сыворотке крови, спинно-мозговой жидкости, контроля концентрации лекарств, измерения плотности мочи.

2. Cobas integra – Total Protein Gen .2

Принцип теста: двухвалентная медь реагирует в щелочном растворе с белковыми пептидными связями с образованием характерного пурпурного цветного биуретового комплекса.

3. Определение белковых фракций сыворотки крови методом электрофореза на ацетатцеллюлозной пленке.

Буферный раствор предназначен для электрофоретического разделения белков сыворотки крови на мембранах из ацетатцеллюлозы с последующим денситометрическим определением белковых фракций.

ПРИНЦИП МЕТОДА

Принцип электрофоретического разделения белков основан на различной скорости движения молекул белков сыворотки крови в постоянном электрическом поле определенной напряженности. Разделенные белковые фракции окрашиваются красителем. Интенсивность окраски белковых фракций пропорциональна их количеству.

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Сыворотка крови, свободная от гемолиза, липемии и не желтушная. Белковые фракции сыворотки крови стабильны в плотно закрытой пробирке при 18-25 в течение 8 часов, при 2-8 – в течение 3 дней, при 20 – в течение 1 месяца.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

1. Проведение электрофореза

1.1. сухие мембраны осторожно положить на поверхность буфера для электрофореза, избегая быстрого их погружения, и выдержать до полного смачивания. Смоченные мембраны аккуратно промокнуть между листами плотной фильтровальной бумаги, не допуская их высыхания. Перед нанесением образцов желательно провести фазу префореза. Для этого мембрану следует поместить в камеру для электрофореза и включить ток в выбранном режиме на 10 минут. Фазу префореза можно заменить длительным замачиванием мембраны в растворе буфера (несколько часов).

1.2. с помощью аппликатора нанести анализируемые образцы сыворотки крови на расстоянии 2-3 см от катодного края мембраны. Мембрану поместить в электрофоретическую камеру и подключить ток.

2. Обработка электрофореграммы

2.1. краситель Пунцовый С.

После отключения тока мембрану осторожно перенести в раствор красителя на 3-5 минут, затем дважды на 3 минуты в 5-7% раствор уксусной кислоты (до отбеливания фона).

1.2. электрофореграмму обработать с помощью сканера и компьютерной программы.

4. Тимоловая проба

Принцип метода:

Сывороточные бета-глобулины, гамма-глобулины и липопротеины осаждаются при рН 7.55 тимоловым реактивом. В зависимости от количества и взаимного отношения белковых фракций при реакции возникает помутнение, интенсивность которого измеряют турбидиметрически.

Клинико-диагностическое значение:

Тимоловая проба более пригодна для функционального исследования печени, чем коллоидно-устойчивые пробы. Считают что она положительна в 90-100 % случаев болезни Боткина (уже в преджелтушной ее стадии и при безжелтушной форме) и при токсическом гепатите. Реакция положительна при послегепатитном и постнекротическом, особенно желтушном циррозе (в отличие от других форм циррозов), при коллагеновых заболеваниях, малярии и вирусных инфекциях. При механической желтухе она (в 75% случаев) отрицательна, что имеет дифференциально-диагностическое значение.

При механической желтухе проба становится положительной лишь в случае, если процесс осложняется паренхиматозным гепатитом. Для дифференциации механической желтухи от паренхиматозной большое значение имеет применение тимоловой пробы с пробой Бурштейна (на бета- и пре-беталипопротеиды).

При паренхиматозной желтухе обе пробы положительны, при механической желтухе тимоловая проба отрицательна, проба Бурштейна – резко положительна.

Список использованной литературы

1. Специфические белки в клинической лабораторной диагностике: вопросы и ответы. – Тёпфер Г., Тома Р., Цавта Б., М., 2004. – 96с