स्वास्थ्य के लिए 1978 ल्यूकोसाइट लसीका का प्रतिरक्षाविज्ञानी अध्ययन। एलर्जेन परीक्षण और ल्यूकोसाइट लसीका के बीच क्या अंतर है? आपको किस परिणाम पर अधिक विश्वास करना चाहिए? कार्य का सामान्य विवरण

यह आविष्कार जैव प्रौद्योगिकी के क्षेत्र से संबंधित है। इस विधि में नियमित एलर्जी परीक्षणों के माध्यम से स्वस्थ खेतों और यार्डों में ट्यूबरकुलिन पर प्रतिक्रिया करने वाले जानवरों की पहचान करना शामिल है। उन जानवरों से जो ट्यूबरकुलिन पर सकारात्मक प्रतिक्रिया करते हैं, रक्त की जांच विशिष्ट ल्यूकोसाइट लसीस प्रतिक्रिया (आरएसएलएल) का उपयोग करके की जाती है, जिसमें स्तनधारियों के लिए पीपीडी, पक्षियों के लिए पीपीडी और ट्यूबरकुलिन के डायग्नोस्टिकम के रूप में सीएएम का उपयोग किया जाता है। यह विधि ट्यूबरकुलिन परीक्षण के लिए विशिष्ट और गैर-विशिष्ट सकारात्मक प्रतिक्रियाओं को अलग करना और रोग के प्रारंभिक चरण में तपेदिक का निदान करना संभव बनाती है। 4 वेतन फ़ाइलें, 7 टेबल।

आविष्कार पशु चिकित्सा से संबंधित है, विशेष रूप से माइकोबैक्टीरिया के कारण होने वाले तपेदिक के विभेदक निदान के तरीकों को व्यक्त करने के लिए अलग - अलग प्रकार.

यह ज्ञात है कि समृद्ध खेतों में तपेदिक का प्राथमिक निदान एक जटिल तरीके से स्थापित किया जाता है - एपिज़ूटोलॉजिकल, क्लिनिकल, एलर्जिक, पैथोलॉजिकल और प्रयोगशाला (1.)

कई मामलों में सूचीबद्ध निदान विधियां कम समय में तपेदिक का अंतिम निदान करने की अनुमति नहीं देती हैं।

जनता के लिए आजीवन अनुसंधानतपेदिक (2) के लिए एलर्जी निदान परीक्षण का उपयोग किया जाता है। हालाँकि, गैर-तपेदिक पशुओं में तपेदिक के प्रति बड़े पैमाने पर गैर-विशिष्ट प्रतिक्रियाओं की उपस्थिति सकारात्मक तपेदिक परीक्षण (1; 2) के आधार पर समृद्ध खेतों में तपेदिक का निदान करने की अनुमति नहीं देती है।

गैर-विशिष्ट ट्यूबरकुलिन प्रतिक्रियाओं को अलग करने के लिए, दो एलर्जेन के साथ एक साथ परीक्षण (प्रोटोटाइप) किया जाता है - स्तनधारियों के लिए पीपीडी और केएएम एलर्जेन, जो एटिपिकल माइकोबैक्टीरिया (2; 3; 4) के कई उपभेदों से बना होता है।

बड़े और छोटे तपेदिक के प्रारंभिक निदान के लिए एक साथ एलर्जी परीक्षण का उपयोग किया जाता है पशुऔर स्वस्थ फार्मों में मुर्गियां और ऐसे मामलों में जहां ट्यूबरकुलिन की प्रतिक्रिया एटिपिकल माइकोबैक्टीरिया और एसिड-फास्ट सैप्रोफाइट्स (3) के कारण होती है।

अधिक दूध देने वाली गायों के मालिक जानवरों के नियंत्रण और नैदानिक ​​वध की वैधता को चुनौती दे रहे हैं सकारात्मक प्रतिक्रियाट्यूबरकुलिन परीक्षण के लिए, और तपेदिक के लिए अत्यधिक उत्पादक जानवरों का दोबारा परीक्षण करने के लिए इंट्राविटल डायग्नोस्टिक तरीकों की आवश्यकता होती है। हमारी प्रस्तावित "विधि" का उपयोग करना शीघ्र निदानपशु तपेदिक" इसमें स्पष्टता लाता है विवादित मसला, क्योंकि यह ट्यूबरकुलिन के इंट्राडर्मल इंजेक्शन के प्रति जानवर के शरीर की प्रतिक्रिया की विशिष्टता या गैर-विशिष्टता को स्पष्ट रूप से स्थापित करना और अंततः निदान करना संभव बनाता है।

इसके अलावा, जानवरों के अंतिम तपेदिक के 30 या अधिक दिनों के बाद एक साथ परीक्षण की अनुमति है, जो अध्ययन की छोटी अवधि में तपेदिक के प्रारंभिक (प्रीक्लिनिकल) निदान की आवश्यकताओं को पूरा नहीं करता है।

इस प्रकार, तपेदिक के निदान के लिए ज्ञात तरीकों के नुकसान श्रम तीव्रता, लंबे शोध समय और संक्रमण के बाद पहले दिनों में माइकोबैक्टीरिया के प्रकार को निर्धारित करने में असमर्थता हैं।

यह विधि तुरंत प्रकट होने पर आधारित है अतिसंवेदनशीलताल्यूकोसाइट्स शरीर के बाहर एंटीजन (एलर्जी) के साथ फिर से संपर्क करते हैं। आविष्कार का उद्देश्य एक नई पद्धति विकसित करना है। यह लक्ष्य विशिष्ट ल्यूकोसाइट लसीका प्रतिक्रिया (आरएसएलएल) का उपयोग करके प्राप्त किया जाता है।

नियमित एलर्जी परीक्षणों द्वारा समृद्ध खेतों और यार्डों में पहचाने जाने वाले, ट्यूबरकुलिन पर सकारात्मक प्रतिक्रिया करने वाले जानवरों के आरएसएलएल के रक्त की जांच करके, निदान के रूप में ट्यूबरकुलिन का उपयोग करके (स्तनधारियों के लिए पीपीडी, पक्षियों के लिए पीपीडी और केएएम) विधि को अंजाम दिया जाता है।

इसके अलावा, मवेशियों में तपेदिक का निदान करते समय, आरएसएलएल को स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन, पक्षियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन और केएएम - एटिपिकल माइकोबैक्टीरिया से एक जटिल एलर्जेन के साथ किया जाता है।

सूअरों में तपेदिक का निदान स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन और पक्षियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन से किया जाता है।

कुत्तों और मांसाहारियों में तपेदिक का निदान करते समय, आरएसएलएल स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन का उपयोग करता है।

खरगोशों और फर वाले जानवरों में तपेदिक का निदान आरएसएलएल स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन, पक्षियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन और केएएम के साथ किया जाता है।

तपेदिक अनुसंधान संगठन आरएसएलएल

खरगोशों, कुत्तों, सूअरों और बछड़ों पर प्रयोगों में, जानवरों के जीवों को टीकाकरण की खुराक में संवेदनशील बनाने के लिए बीसीजी-1 वैक्सीन स्ट्रेन के जीवित माइकोबैक्टीरिया का उपयोग किया गया: एक (0.05 मिलीग्राम), दो (0.1 मिलीग्राम), तीन (0.15 मिलीग्राम), पांच (0.25 मिलीग्राम) और दस (0.50 मिलीग्राम)।

अध्ययन बरकरार बीसीजी-टीकाकरण वाले जानवरों के रक्त ल्यूकोसाइट्स पर और उत्पादन स्थितियों में प्रयोगात्मक स्थितियों के तहत किया गया था - गायों ने दो बार मैटवीवो में रासवेट कृषि उत्पादन परिसर में स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन के इंट्राडर्मल प्रशासन पर सकारात्मक प्रतिक्रिया दी थी। कुर्गन क्षेत्र.

अनुसंधान का मुख्य लक्ष्य विभेदक निदान और निर्धारण के लिए आरएसएलएल के परिणामों का उपयोग करना है:

1) बीसीजी वैक्सीन के माइकोबैक्टीरिया द्वारा पशु शरीर के ल्यूकोसाइट्स का संवेदीकरण;

2) गायों का संक्रमण जिसने दोहरी सकारात्मक ट्यूबरकुलिन प्रतिक्रिया दी;

3) अंतःचर्मिक रूप से प्रशासित होने पर ट्यूबरकुलिन के प्रति गैर-विशिष्ट प्रतिक्रियाएं।

प्रयोग के लिए चिकित्सकीय रूप से स्वस्थ अक्षुण्ण जानवरों का चयन किया गया और उन्हें पृष्ठभूमि नियंत्रण के रूप में कार्य किया गया। समूह जानवरों द्वारा बनाए गए थे जिनमें रक्त के नमूनों की 3-गुना जांच के दौरान हेमटोलॉजिकल मापदंडों (ल्यूकोसाइट्स की संख्या,% लसीका, आदि) के स्थिर मूल्य प्राप्त किए गए थे।

प्रत्येक प्रायोगिक समूह में कम से कम तीन जानवरों को लिया गया। प्रत्येक जानवर से रक्त लिया गया और उसे नियंत्रण और प्रायोगिक नमूनों में विभाजित किया गया। नियंत्रण नमूने में, रक्त में 0.9% शारीरिक सोडियम क्लोराइड समाधान जोड़ा गया था, और प्रायोगिक रक्त नमूनों में - ट्यूबरकुलिन - स्तनधारियों के लिए पीपीडी, पक्षियों के लिए पीपीडी और केएएम।

कणिकाओं की गिनती करने और रक्त प्रतिक्रिया संकेतकों के विश्वसनीय औसत मान प्राप्त करने की तकनीक में ध्यान की त्रुटियों को खत्म करने के लिए, प्रत्येक नमूने (नियंत्रण और प्रयोगात्मक) की तीन प्रतियों में जांच की गई।

तपेदिक आरएसएलएल के लिए एक अध्ययन आयोजित करने की प्रक्रिया

तपेदिक के लिए जानवरों का अध्ययन सबसे पहले "विभिन्न प्रजातियों के जानवरों में तपेदिक के एपिज़ूटिक नियंत्रण और निदान" (2) द्वारा प्रदान किए गए तरीके और समय सीमा में तपेदिक की विधि द्वारा किया जाता है।

स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन, पक्षियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन और एटिपिकल माइकोबैक्टीरिया (सीएएम) से एक जटिल एलर्जेन का उपयोग निदान के रूप में किया जाता है।

तपेदिक मुक्त झुंडों, समूहों और व्यक्तिगत जानवरों में, मुख्य शोध विधि इंट्राडर्मल ट्यूबरकुलिन परीक्षण है। यदि ट्यूबरकुलिन पर प्रतिक्रिया करने वाले जानवरों की पहचान की जाती है, तो जो सकारात्मक प्रतिक्रिया करते हैं उन्हें अलग कर दिया जाता है, बांध दिया जाता है, और निम्नलिखित निदान के साथ विशिष्ट ल्यूकोसाइट लसीका प्रतिक्रिया (एसएलएलआर) में परीक्षण के लिए उनसे रक्त लिया जाता है:

मवेशियों में, आरएसएलएल में थक्कारोधी रक्त लिया जाता है

ए) सोडियम क्लोराइड का शारीरिक समाधान (नियंत्रण नमूना);

घ) पक्षियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन।

वहीं, स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन के साथ आरएसएलएल के अध्ययन से सकारात्मक परिणाम देने वाले जानवरों को तपेदिक माना जाता है

सूअरों में, आरएसएलएल में थक्कारोधी रक्त लिया जाता है

ए) शारीरिक खारा समाधान;

बी) स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन;

ग) पक्षियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन।

जिन सूअरों में स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन के साथ आरएसएलएल सकारात्मक निकला, उन्हें तपेदिक माना जाता है, और जिन जानवरों में पक्षियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन के साथ आरएसएलएल सकारात्मक है, उन्हें एवियन माइकोबैक्टीरिया से संक्रमित माना जाता है;

कुत्तों और अन्य छोटे जानवरों में, आरएसएलएल से लिया जाता है

ए) खारा समाधान;

बी) स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन;

खरगोशों में, आरएसएलएल में थक्कारोधी रक्त लिया जाता है

ए) शारीरिक सोडियम क्लोराइड समाधान;

बी) स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन;

ग) पक्षियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन;

साथ ही, स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन के साथ सकारात्मक आरएसएलएल देने वाले खरगोशों को गोजातीय प्रकार के तपेदिक रोगज़नक़ से संक्रमित माना जाता है, और पक्षियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन के साथ - एक एवियन प्रकार के रोगज़नक़ से संक्रमित, सीएएम के साथ - असामान्य के साथ संवेदनशील गैर तपेदिक माइकोबैक्टीरिया।

आविष्कार का उद्देश्य जानवरों के शरीर में तपेदिक के प्रेरक एजेंट का पता लगाने में लगने वाले समय को कम करना और संवेदीकरण का कारण बनने वाले माइकोबैक्टीरिया के प्रकार को निर्धारित करना है।

इस लक्ष्य को प्राप्त करना रोगज़नक़ की शुरूआत के बाद तत्काल अधिग्रहण की घटना पर आधारित है प्रतिरक्षा सक्षम कोशिकाएंशरीर की बढ़ी हुई संवेदनशीलता, रक्त ल्यूकोसाइट्स पर एक ही एंटीजन के शरीर के बाहर बार-बार संपर्क से प्रकट होती है। संक्रमण के बाद अतिसंवेदनशीलता एक सेलुलर घटना है जिसमें शरीर के बाहर ट्यूबरकुलिन के साथ संपर्क करने वाली प्रभावकारी कोशिकाएं संवेदनशील रक्त ल्यूकोसाइट्स होती हैं, जो शरीर की विलंबित-प्रकार की अतिसंवेदनशीलता (डीएचटी) से भिन्न होती है, जो जानवरों में संक्रमण के 2-3 सप्ताह बाद विकसित होती है। तपेदिक का प्रेरक एजेंट.

कार्यान्वयन विधि

पशु तपेदिक के शीघ्र निदान के लिए एक विधि अपनाई जाती है इस अनुसार. परीक्षण रक्त के 0.1 मिलीलीटर और 0.05 मिलीलीटर (टेस्ट ट्यूब) की मात्रा में ट्यूबरकुलिन की एक कार्यशील खुराक को सोडियम साइट्रेट (हेपरिन, ट्रिलोन बी या किसी अन्य एंटीकोआगुलेंट) के 3.8% समाधान के 0.05 मिलीलीटर युक्त एक टैबलेट के कुएं में जोड़ा जाता है। . नियंत्रण ट्यूबों को ट्यूबरकुलिन के बिना शारीरिक समाधान के साथ समान मात्रा में भरा जाता है। प्लेट के कुओं में रक्त को t=37°C पर 2 घंटे के लिए ऊष्मायन किया जाता है, हर 30 मिनट में हिलाया जाता है। फिर, नियंत्रण और प्रायोगिक कुओं से, 0.02 मिलीलीटर रक्त को 0.4 मिलीलीटर तुर्क तरल (3-5% समाधान) के साथ एक कुएं में स्थानांतरित किया जाता है एसीटिक अम्ल, लाल रक्त कोशिकाओं को नष्ट करने और ल्यूकोसाइट्स के नाभिक को दागने के लिए मेथिलीन नीले घोल की कुछ बूंदों से रंगा हुआ)। सभी कुओं में ल्यूकोसाइट्स (गोरियाव कक्ष में) की संख्या की गणना करें और सूत्र का उपयोग करके विशिष्ट ल्यूकोसाइट लसीका (प्रतिशत में) की प्रतिक्रिया दर की गणना करें

जहां एल के और एल ओ नियंत्रण और प्रायोगिक नमूनों में ल्यूकोसाइट्स की पूर्ण संख्या हैं। आरएसएलएल को सकारात्मक माना जाता है जब यह 10% या अधिक होता है।

उदाहरण 1. ट्यूबरकुलिन की कार्यशील खुराक

ट्यूबरकुलिन की कार्यशील खुराक (थक्कारोधी, रक्त और ट्यूबरकुलिन का अनुपात) निर्धारित करने के लिए प्रयोगों की योजना

ट्यूबरकुलिन की कार्यशील खुराक निर्धारित करने के लिए प्रायोगिक डिजाइन में, यह दिखाया गया कि नमूनों में थक्कारोधी और रक्त की मात्रा का अनुपात समान रहा, और ट्यूबरकुलिन की खुराक में वृद्धि हुई: 0.05; 0.1 और 0.15 मिली

जैसा कि तालिका 1 और 2 से देखा जा सकता है, सभी नमूनों में आरएसएलएल मवेशियों, सूअरों में 3%, कुत्तों में 7.4% और खरगोशों में 2% से अधिक नहीं है, इसलिए ट्यूबरकुलिन की 0.05 मिलीलीटर की खुराक का उपयोग करना अधिक किफायती है। कार्यशील खुराक, क्योंकि उसका आरएसएलएल 0.15 की खुराक से कम था। और इसका मूल्य स्तनधारियों के पीपीडी, पक्षियों के पीपीडी और केएएम के लिए लगभग समान था।

इस प्रकार, आरएसएलएल के लिए ट्यूबरकुलिन की कार्यशील खुराक 0.05 मिली निर्धारित की जाती है।

उदाहरण 2. बीसीजी-1 टीका लगाए गए सांडों के आरएसएलएल रक्त की विशिष्टता और गतिविधि

4-6 महीने के बैलों पर प्रयोगों में आरएसएलएल की विशिष्टता और गतिविधि का अध्ययन किया गया। इसके लिए, जानवरों को टीकाकरण खुराक में बीसीजी -1 वैक्सीन स्ट्रेन के जीवित माइकोबैक्टीरिया का इंजेक्शन लगाया गया: 0.05 मिलीग्राम, 0.15 मिलीग्राम, 0.25 मिलीग्राम और 0.50 मिलीग्राम (एक, तीन, पांच, दस खुराक), और फिर आरएसएलएल में रक्त की जांच की गई। टीकाकरण के दिन और 10 दिनों (240 घंटे) तक हर 24 घंटे में।

स्तनधारियों के लिए पीपीडी वाले रक्त नमूनों में ल्यूकोसाइट्स की संख्या 8.2 से 9.1·10 9 /ली तक थी। यह विशिष्ट है कि बीसीजी के टीके लगाए गए बैलों के रक्त के नमूनों में, जब स्तनधारियों के लिए पीपीडी के साथ बातचीत की जाती है, तो अन्य नमूनों की तुलना में टीका लगाने के 48-120 घंटे बाद ल्यूकोसाइट्स की संख्या में कमी देखी गई, लेकिन उनकी संख्या सामान्य के भीतर थी। श्रेणी।

पक्षियों और सीएएम के लिए शारीरिक समाधान पीपीडी के साथ रक्त के नमूनों में जीवित माइकोबैक्टीरिया की शुरूआत के कुछ ही घंटों में, ल्यूकोसाइट्स की संख्या लगभग समान थी और 9.2 से 11.3 · 10 9 / एल तक थी, यानी। ल्यूकोसाइटोसिस का पता चला था, जो जितना मजबूत था, माइकोबैक्टीरिया वैक्सीन पीसी की टीकाकरण खुराक उतनी ही अधिक होगी। बीसीजी-1.

जैसा कि तालिका 3 से देखा जा सकता है, स्तनधारियों के लिए पीपीडी वाले रक्त नमूनों में, बीसीजी वैक्सीन के साथ मवेशियों के संवेदीकरण के 24 घंटे बाद ही सकारात्मक आरएसएलएल का पता लगाया गया था; पक्षियों और सीएएम के लिए डीपीडी वाले रक्त नमूनों में, आरएसएलएल संकेतक नकारात्मक थे।

प्राप्त शोध परिणाम आरएसएलएल की विशिष्टता को दर्शाते हैं। आरएसएलएल का उपयोग ट्यूबरकुलिन से संबंधित एंटीजन के साथ माइकोबैक्टीरिया द्वारा संवेदनशील जानवरों की पहचान करने के लिए किया जा सकता है।

आरएसएलएल की गतिविधि की विशेषता इस तथ्य से है कि जीवित माइकोबैक्टीरिया वैक्सीन की बढ़ती खुराक के साथ पीसी। प्रति पशु 0.05 मिलीग्राम से 0.50 मिलीग्राम तक बीसीजी-1 आरएसएलएल संकेतक को बढ़ाता है।

इस प्रकार, यह पाया गया कि जब बीसीजी-1 की एक टीकाकरण खुराक के साथ टीकाकरण किया गया, तो स्तनधारियों के लिए पीपीडी के साथ आरएसएलएल की उच्चतम दर इंजेक्शन के 48-72 घंटे बाद (27-23%) थी।

जब मवेशियों को तीन टीकाकरण खुराकों के साथ संवेदनशील बनाया जाता है, तो उसी समय सकारात्मक आरएसएलएल संकेतक भी देखे जाते हैं। बीसीजी वैक्सीन के प्रशासन के बाद लसीका का अधिकतम प्रतिशत 32.5% तक पहुंच जाता है।

जब पशुओं को टीकाकरण की पांच खुराकें दी गईं, तो ल्यूकोसाइट्स का लसीका लंबा हो गया और बढ़ने की प्रवृत्ति थी। यह प्रवृत्ति विशेष रूप से तब स्पष्ट रूप से देखी गई जब जानवरों को बीसीजी वैक्सीन की 10 टीकाकरण खुराकें दी गईं, जब वैक्सीन के इंजेक्शन के 48 घंटे बाद ल्यूकोसाइट्स का लसीका 48.3% तक पहुंच गया और लंबा था, यानी। टीकाकरण खुराक की संख्या में वृद्धि के साथ, संवेदनशील ल्यूकोसाइट्स का प्रतिशत बढ़ गया और इससे आरएसएलएल संकेतक प्रभावित हुए (तालिका 3)।

बीसीजी-1 वैक्सीन की टीकाकरण खुराक की संख्या के आधार पर आरएसएलएल संकेतकों के परिणाम आरएसएलएल की स्पष्ट गतिविधि का संकेत देते हैं।

इस प्रकार, माइकोबैक्टीरियम बीसीजी की एक टीकाकरण खुराक के साथ 120 घंटे से अधिक स्तनधारियों के लिए पीपीडी के साथ आरएसएलएल की औसत दैनिक दर 18.8%, तीन - 20.8%, पांच - 19.24% और दस - 32.2% थी। बीसीजी की दस टीकाकरण खुराक के साथ, स्तनधारियों के लिए पीपीडी के साथ आरएसएलएल के सकारात्मक संकेतक सात दिनों तक बढ़ जाते हैं।

जीवित माइकोबैक्टीरिया वैक्सीन पीसी के इंजेक्शन के साथ अध्ययन किया। बीसीजी ने आरएसएलएल की विशिष्टता और गतिविधि को स्थापित करना संभव बना दिया, जो ट्यूबरकुलिन के लिए विशिष्ट और गैर-विशिष्ट प्रतिक्रियाओं के विभेदक निदान के लिए आवश्यक है।

उदाहरण 3. जीवित माइकोबैक्टीरिया वैक्सीन पीसी की शुरूआत के कारण सूअरों में संवेदनशीलता निर्धारित करने के लिए अध्ययन। बीसीजी-1

प्रयोग तीन समूहों के दूध छुड़ाए पिगलेट पर किए गए, जिन्हें बीसीजी वैक्सीन की एक, तीन और पांच टीकाकरण खुराकें दी गईं। स्तनधारियों के लिए DPD के साथ BCG वैक्सीन की एक खुराक से संवेदनशील सूअरों में ल्यूकोसाइट्स की संख्या 7.2 से 8.8·10 9 /l तक थी, और पक्षियों के लिए खारा समाधान DPD के साथ 8.7 से 14.3·10 9 /l तक थी। ल्यूकोसाइट्स की उच्चतम संख्या टीकाकरण के 48 घंटे बाद थी। बीसीजी वैक्सीन की तीन और पांच टीकाकरण खुराक की शुरूआत के साथ एक ही पैटर्न देखा गया, जहां 48 घंटों के बाद पक्षियों के लिए खारा समाधान और पीपीडी के साथ ल्यूकोसाइट्स की संख्या क्रमशः 15.4 और 18.6·10 9 / एल तक पहुंच गई। परिणामस्वरूप, एक टीकाकरण खुराक के साथ 24 घंटे के बाद संवेदनशील सूअरों में स्तनधारियों के लिए पीपीडी के साथ आरएसएलएल की दर 26.9%, तीन - 28.9%, पांच - 38.1% थी। उच्चतम आरएसएलएल दर संवेदीकरण के 48-72 घंटे बाद थी और 46.6-49.7% थी; 41.5-46.7%; खुराक के अनुसार 49.7-55.4% (तालिका 4)।

टीका लगाए गए सूअरों में, बीसीजी वैक्सीन की एक, तीन और पांच टीकाकरण खुराक के प्रशासन के 24-120 घंटे बाद आरएसएलएल के सकारात्मक संकेतक पाए गए।

पक्षियों के लिए डीपीडी के साथ आरएसएलएल नकारात्मक था, जो स्तनधारियों के लिए डीपीडी के साथ आरएसएलएल की विशिष्टता की पुष्टि करता है।

उदाहरण 4. टीके के टुकड़े के जीवित माइकोबैक्टीरिया की शुरूआत के कारण कुत्तों में संवेदनशीलता का निर्धारण करने के लिए अध्ययन। बीसीजी-1

बीसीजी वैक्सीन की एक, तीन, पांच टीकाकरण खुराक के प्रशासन के बाद कुत्तों पर प्रयोगों में, यह पाया गया कि 24-72 घंटों के बाद जब रक्त खारा समाधान के साथ बातचीत करता है, तो ल्यूकोसाइट्स की संख्या 5.2-6.2 10 9 / एल थी, और स्तनधारियों के लिए डीपीपी के साथ 3 .4-4.7 10 9 /ली, यानी। ल्यूकोपेनिया नोट किया गया था।

खारा समाधान के साथ ल्यूकोसाइट्स की संख्या मानक की तुलना में दो या अधिक गुना बढ़ गई थी। परिणामस्वरूप, आरएसएलएल संकेतक एक खुराक के साथ 14-25%, तीन के साथ 20.8-60.6% और पांच के साथ 22-68% थे। उच्चतम आरएसएलएल दर टीकाकरण के 48 घंटे बाद थी। सकारात्मक आरएसएलएल संकेतक 24-96 घंटों के बाद एक खुराक के साथ, 24-120 घंटों के बाद तीन के साथ, 24-240 घंटों के बाद पांच के साथ नोट किए गए थे। टीके की खुराक में वृद्धि के साथ, ल्यूकोसाइट संवेदीकरण की अवधि बढ़ गई और गतिविधि - आरएसएलएल संकेतक - बढ़ गई (तालिका 5)।

उदाहरण 5. जीवित माइकोबैक्टीरिया वैक्सीन पीसी की शुरूआत के कारण खरगोशों में संवेदनशीलता निर्धारित करने के लिए अध्ययन। बीसीजी-1

जब खरगोशों को बीसीजी वैक्सीन की पांच टीकाकरण खुराक से टीका लगाया जाता है, तो सबसे अधिक कम सामग्रीस्तनधारियों के लिए पीपीडी के साथ बातचीत के दौरान रक्त में ल्यूकोसाइट्स 24 और 72 घंटों (4.6-4.7 10 9 / एल) के बाद पाए गए, और दस खुराक पर स्तनधारियों के लिए पीपीडी के साथ बातचीत के दौरान ल्यूकोसाइट्स की सबसे कम संख्या 24 घंटों (3.8 10 9) के बाद पाई गई। /ली) और 48 घंटे (4.7 10 9 /ली)। एक विशेष विशेषता यह है कि टीकाकरण के 72-264 घंटे और 408 घंटे बाद स्तनधारियों के लिए पीपीडी के साथ रक्त की बातचीत के दौरान, ल्यूकोसाइट्स की संख्या सामान्य से कई गुना अधिक थी और 11-28.5 10 9 / एल, यानी की मात्रा थी। ल्यूकोपेनिया के बजाय, ल्यूकोसाइटोसिस नोट किया गया था। और साथ ही, खारा समाधान (नियंत्रण नमूने) वाले नमूनों में ल्यूकोसाइट्स की संख्या प्रायोगिक नमूनों में उनकी संख्या से काफी अधिक हो गई और 25.0-38.7 · 10 9 /एल हो गई। यह पाया गया कि बीसीजी वैक्सीन की बड़ी खुराक के प्रशासन के कारण होने वाले ल्यूकोसाइटोसिस की पृष्ठभूमि के खिलाफ, खरगोशों में आरएसएलएल सकारात्मक था और 13.7 से 72% (तालिका 5) के बीच था।

उदाहरण 6. आरएसएलएल गायों के रक्त के नमूनों का अध्ययन जिन्होंने ट्यूबरकुलिन पर दोहरी सकारात्मक प्रतिक्रिया दी

उत्पादन स्थितियों के तहत ल्यूकोसाइट्स आरएसएलएल के विशिष्ट लसीका की प्रतिक्रियाओं द्वारा तपेदिक का निदान मैटवीवो-कुर्गन क्षेत्र में रासवेट एसईसी में किया गया था।

अक्टूबर 2006 में, एक पहले से सफल फार्म पर, परीक्षण की गई 198 में से सात गायों ने ट्यूबरकुलिन के प्रति सकारात्मक प्रतिक्रिया व्यक्त की। जब 45 दिनों के बाद बार-बार तपेदिक की जांच की गई, तो उन्होंने फिर से सकारात्मक प्रतिक्रिया दी। जब ट्यूबरकुलिन को त्वचा के अंदर प्रशासित किया गया, तो पेस्टी स्थिरता की फैली हुई सूजन बन गई, त्वचा की तह 5-10 मिमी तक गाढ़ा।

वध से पहले, विशिष्ट ल्यूकोसाइट लसीका प्रतिक्रिया (एसएलएलएल) में परीक्षण के लिए गायों से रक्त लिया गया था। ट्यूबरकुलिन के प्रति स्पष्ट प्रतिक्रिया वाली गायों में ल्यूकोसाइट्स और आरएसएलएल संकेतकों की संख्या पर अध्ययन के परिणाम तालिका 6 में प्रस्तुत किए गए हैं।

जैसा कि तालिका 6 से देखा जा सकता है, ट्यूबरकुलिन के इंट्राडर्मल इंजेक्शन का जवाब देने वाली सात गायों में से केवल चार में रक्त के नमूनों की परस्पर क्रिया पर सकारात्मक आरएसएलएल (इन्वेंट्री नंबर 6827; नंबर 071; नंबर 4018; नंबर 148) था। स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन के साथ। पक्षियों और सीएएम के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन वाले रक्त के नमूनों ने नकारात्मक आरएसएलएल मान दिए।

ट्यूबरकुलिन पर सकारात्मक प्रतिक्रिया करने वाली गायों के नियंत्रण और नैदानिक ​​​​वध की एक पशुचिकित्सा परीक्षा से पता चला कि सकारात्मक आरएसएलएल संकेतक वाले चार जानवरों में से केवल दो में लिम्फ नोड्स में तपेदिक की विशेषता वाले परिवर्तन थे: एक शव में सबमांडिबुलर और रेट्रोफेरीन्जियल में, और में मीडियास्टिनल और मेसेन्टेरिक लिम्फ नोड्स में दूसरा। तपेदिक परीक्षण के प्रति सकारात्मक प्रतिक्रिया और तपेदिक की विशेषता वाले रोग परिवर्तनों के सकारात्मक आरएसएलएल संकेतक वाली दो गायों के शवों में, आंतरिक अंगऔर लिम्फ नोड्स का प्रत्यक्ष रूप से पता नहीं लगाया गया। यह संभवतः तपेदिक के प्रेरक एजेंट के साथ जानवरों के हाल के संक्रमण के कारण है, और रोग संबंधी परिवर्तनों को अभी तक बनने का समय नहीं मिला है। इसके अलावा, एक पोस्टमार्टम नियंत्रण और नैदानिक ​​​​परीक्षा के दौरान, यह पाया गया कि ट्यूबरकुलिन के इंट्राडर्मल इंजेक्शन पर सकारात्मक प्रतिक्रिया दो गहरी-गर्भवती (गर्भावस्था के 7-8.5 महीने) गायों और स्ट्रेप्टोकोकल संक्रमण के कारण तीव्र एंडोमेट्रैटिस से पीड़ित एक गाय द्वारा दी गई थी। ट्यूबरकुलिन के प्रति सकारात्मक प्रतिक्रिया देने वाली गायों में पैथोलॉजिकल परिवर्तन तालिका 7 में दिखाए गए हैं।

ट्यूबरकुलिन पर सकारात्मक प्रतिक्रिया करने वाली वध की गई गायों की नियंत्रण और नैदानिक ​​​​परीक्षा से पता चला कि सात में से चार मामलों में, एक सकारात्मक ट्यूबरकुलिन परीक्षण एक सकारात्मक आरएसएलएल (बी = 4: 7 = 0.57) के साथ मेल खाता है; एक मामले में (बी=1:7=0.14) 7-8 महीने की गर्भावस्था वाली तीन गायों में से। एक सकारात्मक ट्यूबरकुलिन परीक्षण गहरी गर्भावस्था (8 महीने; बी=1:3=0.33) के साथ मेल खाता है; एक मामले में - स्ट्रेप्टोकोकल संक्रमण (तीव्र एंडोमेट्रैटिस; बी=1:7=0.14) के साथ।

चार सकारात्मक संकेतकों में से दो मामलों में आरएसएलएल तपेदिक (बी = 2: 4 = 0.5) की विशेषता वाले रोग परिवर्तनों का पता लगाने के साथ मेल खाता है, और चार में से दो मामलों में (बी = 2: 4 = 0.5) दृश्य रोग संबंधी डेटा नहीं थे यह पाया गया कि यह माइकोबैक्टीरिया के साथ प्रारंभिक संक्रमण को बाहर करने का आधार नहीं हो सकता है, जब रोग संबंधी परिवर्तन अभी तक नहीं हुए हैं।

साहित्य

1. तपेदिक का निदान. // वी.पी. अर्बन, एम.ए. सफीन, ए.ए. सिदोरचुक, एम.वी. खारितोनोव, आर.एस. सिगबाटुलिन, एफ.जी. अकबरोव। // पशु चिकित्सा स्वच्छता के साथ एपिज़ूटोलॉजी और संक्रामक रोगों पर कार्यशाला। पाठ्यपुस्तक। मॉस्को: कोलोस, 2003, पृ.82-86।

2. विभिन्न प्रजातियों के पशुओं में तपेदिक का एपिज़ूटोलॉजिकल नियंत्रण और निदान। मनुष्यों और जानवरों में होने वाली आम संक्रामक बीमारियों की रोकथाम और नियंत्रण। स्वच्छता एवं पशु चिकित्सा नियमों का संग्रह। ईडी। अधिकारी। रूस की स्वच्छता और महामारी विज्ञान निगरानी के लिए राज्य समिति। रूस के कृषि मंत्रालय। मास्को. 1996, पृ.164-167.

3. पशु तपेदिक के निदान में एटिपिकल माइकोबैक्टीरिया (एएम) से ट्यूबरकुलिन और कॉम्प्लेक्स एलर्जेन का उपयोग करके एक साथ परीक्षण करने के निर्देश। पशु चिकित्सा विधान. खंड 3. मॉस्को: कोलोस, 1981, पीपी 220-224।

4. शारोव ए.एन. क्षय रोग " पशु चिकित्सा औषधियाँ»निर्देशिका (डी.एफ. ओसिडेज़, डॉक्टर ऑफ बायोलॉजिकल साइंसेज द्वारा संपादित)। मॉस्को: कोलोस, 1981, पीपी. 192-201।

1. पशु तपेदिक के शीघ्र निदान के लिए एक विधि, जिसमें नियोजित एलर्जी परीक्षणों द्वारा समृद्ध खेतों और यार्डों में ट्यूबरकुलिन पर प्रतिक्रिया करने वाले जानवरों की पहचान शामिल है, इसमें अंतर यह है कि ट्यूबरकुलिन पर सकारात्मक प्रतिक्रिया करने वाले जानवरों के रक्त की जांच विशिष्ट ल्यूकोसाइट लसीका की प्रतिक्रिया द्वारा की जाती है। (आरएसएलएल) स्तनधारियों के लिए निदान के रूप में पीपीडी ट्यूबरकुलिन, पक्षियों के लिए पीपीडी और केएएम का उपयोग कर रहा है।

2. दावे 1 के अनुसार तपेदिक के शीघ्र निदान की विधि, इसकी विशेषता यह है कि मवेशियों में तपेदिक का निदान करते समय, आरएसएलएल को स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन, पक्षियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन और एटिपिकल माइकोबैक्टीरिया से केएएम-कॉम्प्लेक्स एलर्जेन के साथ किया जाता है।

3. दावे 1 के अनुसार तपेदिक के शीघ्र निदान की विधि की विशेषता यह है कि सूअरों में तपेदिक का निदान करते समय, स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन और पक्षियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन के साथ आरएसएलएल किया जाता है।

// 2341288 // 2443428

यह आविष्कार पशु चिकित्सा सूक्ष्म जीव विज्ञान के क्षेत्र से संबंधित है

यह आविष्कार जैव प्रौद्योगिकी के क्षेत्र से संबंधित है

शुभ दिन! मेरा नाम एलविरा है. मुख्य समस्या दवाओं की है. उदाहरण के लिए, मैं बुखार होने पर पेरासिटामोल लेता हूं - क्विन्के की एडिमा शुरू होती है, पहली बार मुझे लगा कि यह एक गलती थी, मैंने बाद की बीमारी के दौरान अतिरिक्त दवाओं और उत्तेजक खाद्य पदार्थों (शहद, रसभरी, आदि) के बिना इसे आजमाया - नतीजा यह है वही सूजन. मैं एक एलर्जेन परीक्षण करता हूं - परिणाम नकारात्मक है, लेकिन मैं ल्यूकोसाइट्स के विश्लेषण के लिए परीक्षण करता हूं - यह मानक से दो से तीन गुना अधिक है (20-30% के बजाय ... 10% तक)। और इसलिए दवाओं की एक विशाल सूची के साथ, विटामिन, एंटीबायोटिक्स, दर्द निवारक और शामक से लेकर अन्य दवाएं भी शामिल हैं। यदि दवा दी जाती है, तो प्रतिक्रियाएं हमेशा मतली से लेकर चेतना की हानि और 80/40 के निम्न रक्तचाप तक भिन्न होती हैं। कृपया एलर्जेन परीक्षण और लाइसिस के बीच अंतर बताएं?! मैं लगभग निराशा में हूं, मेरे बेटे की भी यही स्थिति है। हम पहले से ही सभी संभावित दुष्प्रभावों का अनुभव कर चुके हैं, हल्की बीमारियों और पित्ती से लेकर एनाफेलेक्टिक शॉक तक (प्रेडनिसोन के लिए धन्यवाद - यह हमेशा मदद करता है)। हम लंबे समय से इस तरह से बीमार हैं: यह अपने आप ठीक हो जाएगा या परीक्षणों द्वारा अनुमोदित दवाओं की हमारी सीमित सूची के साथ अस्पताल जाएगा। लेकिन यह इतना सीमित है कि डॉक्टर असमंजस में हैं, और वे मुझे दोनों परीक्षणों के बीच अंतर नहीं समझा सकते। यदि आप उत्तर लिखते हैं, तो मैं बहुत आभारी रहूँगा, या विश्वकोश का लिंक जहाँ आप उत्तर पा सकते हैं। यहां तक ​​कि निर्धारित से कम खुराक का प्रयास करने का भी विचार था....

18.01.2009, 17:36

नमस्ते!
कृपया निम्नलिखित स्थिति का समाधान सुझाएँ। मुझे दांतों के इलाज में हमेशा समस्याएं आती रही हैं; अभी कुछ समय पहले ही मुझे कई दांत निकलवाने की जरूरत पड़ी थी। दर्द से राहत के लिए सेप्टोनेस्ट का उपयोग किया जाता था। इसके प्रशासन के बाद, दबाव 190 तक बढ़ गया और टैचीकार्डिया 150 बीट/मिनट पर शुरू हुआ। (मेरा रक्तचाप 110 है) तवेगिल इंजेक्शन के बाद मेरा रक्तचाप सामान्य होने लगा। अगले दिन, स्वर बैठना देखा गया। डॉक्टर का मानना ​​है कि एनेस्थेटिक्स मेरे लिए वर्जित हैं: यूबेस्टेसिन, अल्ट्राकाइन, सेप्टोनेस्ट।
चूँकि मुझे अभी भी अपने दाँतों का इलाज कराना है, मुझे क्या करना चाहिए?

19.01.2009, 00:06

क्या इस घटना से पहले ही आपने अपने दांतों का एनेस्थीसिया से इलाज करा लिया था? क्या एनेस्थेटिक के पिछले इंजेक्शनों के साथ भी ऐसी प्रतिक्रिया हुई है, या यह पहली बार है? इस बात में भी रुचि है कि किस प्रकार का एनेस्थीसिया दिया गया था और प्रयुक्त एनेस्थेटिक में एड्रेनालाईन की सांद्रता और बीमारियों की उपस्थिति कार्डियो-वैस्कुलर सिस्टम के
ऐसी प्रतिक्रिया एनेस्थेटिक के प्रवेश से जुड़ी हो सकती है नस(कुछ प्रकार के एनेस्थीसिया से रक्त वाहिका में जाने की संभावना रहती है)। इसके अलावा, ऐसे लक्षण एड्रेनालाईन की प्रतिक्रिया हो सकते हैं, जो संवेदनाहारी का हिस्सा है।
हमारी कंपनी में, स्थानीय एनेस्थेटिक्स के प्रति असहिष्णुता वाले रोगियों को अस्पताल के सर्जिकल दंत चिकित्सा विभाग में भेजा जाता है, जहां स्थानीय एनेस्थीसिया या सामान्य एनेस्थीसिया के तहत उनकी जांच और इलाज किया जाता है।

19.01.2009, 09:51

तुरंत प्रतिसाद के लिए धन्यवाद! इससे पहले, लिडोकेन का उपयोग मामूली हस्तक्षेप के दौरान किया जाता था; मैंने हाल ही में इसका उपयोग करके अपने चेहरे पर एक तिल हटा दिया है। उसने इसे अच्छी तरह से सहन किया, लेकिन खुराक, जाहिरा तौर पर, छोटी थी।
सेप्टोनेस्ट का उपयोग दो बार किया गया था, दूसरे का मैंने आपको वर्णन किया था, और पहला भी दंत चिकित्सा में, जिसके बाद मेरा रक्तचाप 140 तक बढ़ गया और 5-6 घंटों तक मैं दांत से खून बहने से नहीं रोक सका।
से हृदय रोगएक्सट्रैसिस्टोलिक अतालता है।
डॉक्टर ने मुझे मतभेद लिखा: यूबेस्टेज़िन सॉल्यूशन 4 यू, अल्ट्राकाइन सॉल्यूशन 2 यू, सेप्टोनेस्ट सॉल्यूशन। दुर्भाग्य से, मैं एड्रेनालाईन की सांद्रता के बारे में उत्तर नहीं दे सकता।

18.02.2009, 18:33

नमस्ते,
मैंने एनेस्थेटिक्स के लिए एक प्रतिरक्षाविज्ञानी परीक्षण किया और ये परिणाम हैं:

1. अल्ट्राकेन डी-एस - 81 (11%)
2. अल्ट्राकेन डी-एस फोर्टे - 61 (32%)
3. एन्रेनालाईन - 64 (29%)
4. लिडोकेन - 58 (36%)
5. स्कैंडोनेस्ट - 76 (16%)
6. उबेस्टेज़िन फोर्टे - 58 (36%)
7. एंड्रेनालाईन के साथ सेप्टानेस्ट - 65 (28%)
गतिविधि की डिग्री के अनुसार:

यह पता चला है कि दंत चिकित्सा में एनेस्थीसिया के दौरान इन दवाओं का उपयोग (सभी >10%) नहीं किया जा सकता है। तो अब आप क्या कर सकते हैं?

18.02.2009, 21:12

मैं आपको विश्लेषण के मूल्य के संबंध में एक संकेत दूंगा:

"विशिष्ट ल्यूकोसाइटोलिसिस प्रतिक्रिया ने निम्नलिखित दवाओं के साथ नियंत्रण 91 (100%) की तुलना में ल्यूकोसाइट्स की संख्या में परिवर्तन दिखाया:
...
4. लिडोकेन - 58 (36%)
...
11% तक लसीका - कमजोर रूप से सकारात्मक
21%-40% तक लसीका - मध्यम सकारात्मक
41%-100% तक लसीका - तीव्र सकारात्मक

इससे पहले, लिडोकेन का उपयोग मामूली हस्तक्षेप के दौरान किया जाता था; मैंने हाल ही में इसका उपयोग करके अपने चेहरे पर एक तिल हटा दिया है। इसे अच्छे से सहन किया

डबोवा बी.एल., पोलाकोवा ओ.एन. जीएनयू एसकेज़निवी, नोवोचेर्कस्क

क्षय रोग भारी आर्थिक क्षति का कारण बनता है और सार्वजनिक स्वास्थ्य के लिए एक बड़ा खतरा पैदा करता है। तपेदिक विरोधी उपायों में प्राथमिक कार्य समय पर निदान और संक्रामक एजेंट के स्रोत की शीघ्र पहचान करना है।

एलर्जी परीक्षणों द्वारा इंट्रावाइटल निदान देर से होता है और जानवरों को उनके संक्रमण के बाद पहले दिनों और यहां तक ​​कि महीनों में भी पता नहीं चलता है। इसलिए, अधिक संवेदनशील तरीकों की आवश्यकता है जो हमें तपेदिक में एलर्जी प्रक्रिया के एटियलजि की पहचान करने की अनुमति दें।

गैर-विशिष्ट ट्यूबरकुलिन प्रतिक्रियाओं को अलग करने के लिए, एलर्जी के साथ एक साथ परीक्षण का उपयोग किया जाता है - स्तनधारियों के लिए पीपीडी और एटिपिकल माइकोबैक्टीरिया के कई उपभेदों से बना सीएएम। स्वस्थ खेतों में ट्यूबरकुलिन के प्रारंभिक निदान के लिए एक साथ एलर्जी परीक्षण का उपयोग किया जाता है और ऐसे मामलों में जहां ट्यूबरकुलिन की प्रतिक्रिया एटिपिकल माइकोबैक्टीरिया और एसिड-फास्ट सैप्रोफाइट्स के कारण होती है। वे पैथोलॉजिकल और बैक्टीरियोलॉजिकल अध्ययन और बायोएसे द्वारा निदान को स्पष्ट करने के लिए, ट्यूबरकुलिन के इंट्राडर्मल इंजेक्शन की प्रतिक्रिया के साथ जानवरों के कमीशन नियंत्रण और नैदानिक ​​वध का भी सहारा लेते हैं।

हालाँकि, अधिक दूध देने वाली गायों के मालिक ट्यूबरकुलिन परीक्षण पर सकारात्मक प्रतिक्रिया देने वाले जानवरों के नियंत्रण और नैदानिक ​​वध की वैधता पर विवाद करते हैं, और इंट्राविटल निदान विधियों की मांग करते हैं। अतिरिक्त शोधतपेदिक के लिए अत्यधिक उत्पादक जानवर। इसलिए, एक साथ एलर्जी परीक्षण के अलावा, पैथोलॉजिकल परीक्षाएं और प्रयोगशाला अनुसंधान, खेतों का एपिज़ूटोलॉजिकल सर्वेक्षण, एलर्जी प्रतिक्रियाओं की गतिशीलता का विश्लेषण विभिन्न समूहजानवरों में, मवेशियों में गैर-विशिष्ट ट्यूबरकुलिन प्रतिक्रियाओं का अध्ययन करने और उन्हें विशिष्ट लोगों से अलग करने के लिए, इन विट्रो में सेलुलर प्रतिक्रियाओं का उपयोग किया जाता है - लिम्फोसाइटों के विस्फोट परिवर्तन की प्रतिक्रिया और ल्यूकोसाइट्स और अन्य प्रतिक्रियाओं के विशिष्ट लसीका।

हमारे अध्ययन में, गैर-विशिष्ट ट्यूबरकुलिन प्रतिक्रियाओं के कारणों की पहचान करने के लिए, हमने रोग संबंधी परिवर्तनों की तुलना में विशिष्ट ल्यूकोसाइट लसीका की प्रतिक्रिया का उपयोग किया।

आरएसएलएल को बी.एल. द्वारा संशोधित के रूप में प्रदर्शित किया गया था। डबोवॉय।

शोध का उद्देश्य विभिन्न प्रकार के माइकोबैक्टीरिया के कारण होने वाले तपेदिक के विभेदक निदान से जुड़ी गैर-विशिष्ट प्रतिक्रियाओं के कारणों की पहचान करना था, जो कि महान पशु चिकित्सा, स्वच्छता, एपिज़ूटिक और आर्थिक महत्व का है।

इन विट्रो में विशिष्ट ल्यूकोसाइट लसीका (एसएलएलआर) की प्रतिक्रिया से माइकोबैक्टीरिया से संक्रमित जानवरों और तपेदिक के रोगियों का पता लगाना शरीर के बाहर एंटीजन (एलर्जी) के साथ बार-बार संपर्क करने के लिए ल्यूकोसाइट्स की तुरंत बढ़ती संवेदनशीलता की घटना पर आधारित है।

उत्पादन स्थितियों के तहत, तपेदिक के संभावित निदान के लिए आरएसएलएल परीक्षण रोस्तोव क्षेत्र के बुनियादी खेतों में किए गए थे। तो, पहले से समृद्ध खेत में, आठ गायों ने ट्यूबरकुलिन पर प्रतिक्रिया की। उनका नियंत्रण एवं नैदानिक ​​वध किया गया। पशु चिकित्सा और स्वच्छता परीक्षण के दौरान, आंतरिक अंगों और लिम्फ नोड्स में कोई रोग संबंधी परिवर्तन दृष्टिगत रूप से नहीं पाया गया। रोस्तोव क्षेत्रीय प्रयोगशाला में पैथोलॉजिकल सामग्री के जीवाणुविज्ञानी अध्ययन नकारात्मक थे।

वध से पहले, एक विशिष्ट ल्यूकोसाइट लसीका प्रतिक्रिया (एसएलएलआर) करने के लिए गायों से रक्त लिया जाता था। रक्त के नमूनों में ल्यूकोसाइट्स की संख्या और आरएसएलएल संकेतकों पर अध्ययन के परिणाम तालिका में प्रस्तुत किए गए हैं।

मेज़। ट्यूबरकुलिन पर प्रतिक्रिया करने वाली गायों में ल्यूकोसाइट्स, रोल संकेतक और रोग संबंधी परिवर्तनों की संख्या।

जैसा कि तालिका से देखा जा सकता है, स्तनधारियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन वाले सभी रक्त नमूनों में, ल्यूकोसाइट्स के विशिष्ट लसीका की प्रतिक्रिया नकारात्मक थी, जो एम. बोविस के साथ संक्रमण की अनुपस्थिति को इंगित करती है।

वध की गई चार गायों के रक्त के नमूनों में, पक्षियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन के साथ विशिष्ट ल्यूकोसाइट लसीका प्रतिक्रिया सकारात्मक थी। नमूनों में ल्यूकोसाइट्स का लिसिस 11%, 20%, 22%, 26% था, जो एम. एवियम से जानवरों के संक्रमण का संकेत देता है।

चार जानवरों के रक्त के नमूनों में, सीएएम के साथ आरएसएलएल का सकारात्मक परिणाम प्राप्त हुआ। ल्यूकोसाइट लसीका का प्रतिशत 11%, 13%, 15%, 20% था, जो जीवन के दौरान असामान्य माइकोबैक्टीरिया के साथ जानवरों के संक्रमण से जुड़ा है।

इस प्रकार, सकारात्मक ट्यूबरकुलिन परीक्षण वाले जानवरों के शरीर के बाहर ट्यूबरकुलिन के साथ किए गए रक्त परीक्षण से तुरंत पहचान करना संभव हो जाता है वास्तविक कारण, जिससे शरीर में ट्यूबरकुलिन के प्रति संवेदनशीलता पैदा हुई और, सबसे महत्वपूर्ण बात, अत्यधिक उत्पादक जानवरों के अनुचित वध को खत्म करना संभव हो गया। कृषि स्थितियों में सीधे गैर-विशिष्ट ट्यूबरकुलिन प्रतिक्रियाओं के लिए इन विट्रो डायग्नोस्टिक पद्धति का उपयोग करने की संभावना विशिष्ट और गैर-विशिष्ट ट्यूबरकुलिन प्रतिक्रियाओं के विभेदक निदान के साधन के रूप में विभिन्न प्रकृति के एलर्जी के व्यापक उपयोग में योगदान देगी।

हम तपेदिक-मुक्त खेतों में गैर-विशिष्ट ट्यूबरकुलिन प्रतिक्रियाओं के निदान के लिए प्रस्तावित विधि का उपयोग करने की सलाह देते हैं। ऐसा करने के लिए, उन सभी जानवरों से रक्त लिया जाता है जिन्होंने ट्यूबरकुलिन के इंट्राडर्मल इंजेक्शन पर सकारात्मक प्रतिक्रिया दी है और मौजूदा ट्यूबरकुलिन के साथ शरीर के बाहर जांच की जाती है, जिससे विभिन्न प्रजातियों के माइकोबैक्टीरिया के कारण होने वाली ट्यूबरकुलिन प्रतिक्रियाओं के एटियलजि की पहचान करना संभव हो जाता है।

ग्रन्थसूची

1. वेरखोवस्की, ओ.ए. मवेशी तपेदिक में सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं का नैदानिक ​​महत्व / ओ.ए. वेरखोवस्की, ए.के.एच. नैमानोव, ओ.ए. सवित्स्काया // जानवरों की संक्रामक विकृति विज्ञान और प्रतिरक्षा विज्ञान की वर्तमान समस्याएं। अंतर्राष्ट्रीय वैज्ञानिक और व्यावहारिक सम्मेलन मास्को की सामग्री, 16-17 मई, 2006। - एम.; इज़ोग्राफ, 2006. - पी.180-186।
2. डबोवॉय, बी.एल. में नई क्रमानुसार रोग का निदानखेत पशुओं का तपेदिक / बी.एल. डुबोवॉय, ओ.एन. सोलोव्योवा, एन.वी. उल्को // वैज्ञानिक कार्यों का संग्रह "निदान, रोकथाम और उपचार संक्रामक रोगखेत के जानवर।" - फारसोव्स्की, 2000. - पी.8-12।
3. डबोवॉय, बी.एल. मवेशियों में तपेदिक के निदान में आरएसएलएल की विशिष्टता और गतिविधि का अध्ययन / बी.एल. डबोवॉय, ओ.एन. पोलाकोवा // कृषि-औद्योगिक परिसर के विकास का अभिनव मार्ग - मुख्य दिशा वैज्ञानिक अनुसंधानके लिए कृषि. - फारसोव्स्की, 2007. - पी.67-69।
4. नैमानोव, ए.के.एच. ट्यूबरकुलिन / ए.के.एच. से एलर्जी प्रतिक्रियाओं का अंतर। नैमानोव // पशु चिकित्सा। - 2002. - एन°3.- पी.10-12।
5. पशु तपेदिक के निदान में एटिपिकल माइकोबैक्टीरिया (एएम) से एक जटिल एलर्जेन, ट्यूबरकुलिन का उपयोग करके एक साथ परीक्षण करने के निर्देश। पशु चिकित्सा विधान. टी. 3, एम.: "कोलोस", 1981.- पी.220-224
6. विभिन्न प्रजातियों के पशुओं में तपेदिक का एपिज़ूटोलॉजिकल नियंत्रण और निदान। मनुष्यों और जानवरों में होने वाली आम संक्रामक बीमारियों की रोकथाम और नियंत्रण। स्वच्छता एवं पशु चिकित्सा नियमों का संग्रह। ईडी। अधिकारी। रूस की स्वच्छता और महामारी विज्ञान निगरानी के लिए राज्य समिति। रूस के कृषि मंत्रालय। मॉस्को, 1996.- पृ. 164 - 167.

निबंध

अधिक संवेदनशील तरीकों की आवश्यकता है जो हमें तपेदिक में एलर्जी प्रक्रिया के कारण की पहचान करने की अनुमति दें। समृद्ध फार्मों में गैर-विशिष्ट ट्यूबरकुलिन प्रतिक्रियाओं के एटियलजि का निर्धारण करने के लिए, पक्षियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन और स्तनधारियों के लिए ट्यूबरकुलिन पर प्रतिक्रिया करने वाले जानवरों के रक्त के साथ शरीर के बाहर सीएएम का उपयोग किया गया था। यह दिखाया गया है कि आरएसएलएल का उपयोग ट्यूबरकुलिन के प्रति विशिष्ट और गैर-विशिष्ट प्रतिक्रियाओं में अंतर करने के लिए किया जा सकता है।

कीवर्ड:निदान, तपेदिक, विशिष्ट ल्यूकोसाइट लसीका प्रतिक्रिया (एसएलएलआर)।

यूडीसी 619.616.002.5

एटिपिकल और एवियन माइकोबैक्टीरीज डुबोवोई बी.एल., पॉलाकोवा ओ.एन. के कारण होने वाली ट्यूबरकुलीन पर अनिर्दिष्ट प्रतिक्रियाओं का निदान। सारांश

अधिक संवेदनशील तरीकों की आवश्यकता है जो तपेदिक में एलर्जी प्रक्रिया के एटियलजि का पता लगा सकें। पक्षियों के लिए पीपीडी-ट्यूबरकुलिन और जानवरों के रक्त के साथ शरीर के बाहर सीएएम, स्तनधारियों के लिए ट्यूबरकुलिन पर प्रतिक्रिया करते हुए, अमीर अर्थव्यवस्थाओं में गैर-विशिष्ट ट्यूबरकुलिन प्रतिक्रियाओं के एटियलजि को निर्धारित करने के लिए उपयोग किया गया था। यह स्थापित किया गया है कि आरएसएलएल का उपयोग ट्यूबरकुलिन के लिए विशिष्ट और अविशिष्ट दोनों प्रतिक्रियाओं के भेदभाव के लिए किया जा सकता है।

मुख्य शब्द:निदान, तपेदिक, ल्यूकोसाइट्स के विशिष्ट लसीका की प्रतिक्रिया (आरएसएलएल)।

लेखक के बारे में

डबोवॉय बोरिस एल. - डी. एससी. पशु चिकित्सा में, प्रोफेसर, कृषि पशुओं के संक्रामक रोगों के प्रमुख और रूसी कृषि विज्ञान अकादमी के राज्य वैज्ञानिक प्रतिष्ठान "उत्तर कोकेशियान जोनल पशु चिकित्सा अनुसंधान संस्थान" के पोल्ट्री अनुसंधान प्रयोगशाला; 6/4. पशुचिकित्सकीय सेंट, नोवोचेर्कस्क, रोस्तोव क्षेत्र, 394400; दूरभाष.89281360864.

संपादकीय बोर्ड के साथ पत्राचार के लिए जिम्मेदार: पोलाकोवा ओल्गा एन. - रूसी कृषि विज्ञान अकादमी के राज्य वैज्ञानिक प्रतिष्ठान "उत्तर कोकेशियान जोनल पशु चिकित्सा अनुसंधान संस्थान" के स्नातकोत्तर छात्र; 28, सदोवैया स्ट्रीट, नोवोचेर्कस्क, रोस्तोव क्षेत्र, 394406; दूरभाष.89287549422

डबोवॉय बोरिस लावेरेंटिएविच, पशु चिकित्सा विज्ञान के डॉक्टर, प्रोफेसर, फार्म जानवरों और पोल्ट्री के संक्रामक रोगों के अध्ययन के लिए प्रयोगशाला के प्रमुख, उत्तरी काकेशस क्षेत्रीय अनुसंधान पशु चिकित्सा संस्थान रूसी अकादमीकृषि विज्ञान; 394400, रोस्तोव क्षेत्र, नोवोचेर्कस्क, सेंट। पशुचिकित्सा, 4, उपयुक्त. 6; दूरभाष: 89281360864.

संपादकों के साथ पत्राचार के लिए जिम्मेदार: पॉलाकोवा ओल्गा निकोलायेवना, रूसी कृषि विज्ञान अकादमी के उत्तरी काकेशस क्षेत्रीय अनुसंधान पशु चिकित्सा संस्थान के स्नातक छात्र; 394406, रोस्तोव क्षेत्र, नोवोचेर्कस्क, सेंट। सदोवया, 28; दूरभाष: 89287549422.

आवश्यकताएं

कार्य क्षेत्र और वायुमंडल की हवा में औद्योगिक रासायनिक एलर्जी की अधिकतम अनुमेय सांद्रता को उचित ठहराने के लिए प्रायोगिक अध्ययन का गठन

पद्धति संबंधी निर्देश

एमयू 1.1.578-96

1. रूसी चिकित्सा विज्ञान अकादमी के व्यावसायिक चिकित्सा अनुसंधान संस्थान (डुएवा एल.एल., अलेक्सेवा ओ.जी.), मानव पारिस्थितिकी और स्वच्छता अनुसंधान संस्थान द्वारा विकसित पर्यावरण RAMS (पिनिगिन एम.ए., टेपिकिना एल.ए.), रूस के स्वास्थ्य और चिकित्सा उद्योग मंत्रालय के इम्यूनोलॉजी संस्थान (चेर्नोसोव ए.डी.), रूस के स्वास्थ्य और चिकित्सा उद्योग मंत्रालय के केंद्रीय त्वचाविज्ञान संस्थान (उमेरोव Zh.G.), सेंट। रूस के स्वास्थ्य और चिकित्सा उद्योग मंत्रालय के पीटर्सबर्ग व्यावसायिक स्वच्छता और व्यावसायिक रोग अनुसंधान संस्थान (सिदोरिन जी.आई., मार्टिंसन टी.जी.), बेलारूसी वैज्ञानिक अनुसंधान स्वच्छता और स्वच्छता संस्थान (शेवल्याकोव वी.वी.), खार्कोव अनुसंधान संस्थान व्यावसायिक स्वच्छता और व्यावसायिक रोग (वासिलेंको एन.एम.) ), केंद्रीय अनुसंधान प्रयोगशाला लातवियाई मेडिकल अकादमी (इवानोवा आई.ए.)।

2. रूस की स्वच्छता और महामारी विज्ञान पर्यवेक्षण के लिए राज्य समिति के प्रथम उपाध्यक्ष द्वारा अनुमोदित और लागू किया गया - उप मुख्य राज्य स्वच्छता डॉक्टर रूसी संघएस. वी. सेमेनोव 21 अक्टूबर 1996

3. पद्धतिगत सिफारिशों को बदलने के लिए पेश किया गया "कार्य क्षेत्र की हवा में औद्योगिक एलर्जी के स्वच्छ मानकीकरण पर अनुसंधान का संगठन" (1980) और इसके अलावा "वायुमंडलीय हवा में प्रदूषकों की अधिकतम अनुमेय सांद्रता के औचित्य के लिए अस्थायी दिशानिर्देश" आबादी वाले क्षेत्रों का” (1989)।

^ 1 उपयोग का क्षेत्र

दिशानिर्देश कार्य क्षेत्र और वातावरण की हवा में हानिकारक पदार्थों के लिए स्वच्छ मानकों को प्रमाणित करने में शामिल विष विज्ञानियों के लिए हैं। दिशानिर्देश कार्य क्षेत्र और वातावरण की हवा में औद्योगिक रासायनिक एलर्जी के लिए स्वच्छ मानकों की स्थापना के लिए समर्पित हैं। वायु पर्यावरण में औद्योगिक एलर्जी के लिए स्वच्छ मानकों (एमएसी और ओएसयूवी) को प्रमाणित करने में दस साल से अधिक के अभ्यास ने एलर्जी-खतरनाक उद्योगों के श्रमिकों और औद्योगिक क्षेत्रों की आबादी में एलर्जी रोगों के विकास को रोकने में इस उपाय की प्रभावशीलता की पुष्टि की है। इन दिशानिर्देशों को टॉक्सिकोलॉजिकल एलर्जी के सिद्धांत और अभ्यास पर वर्षों से एकत्रित आंकड़ों को ध्यान में रखते हुए विकसित किया गया है। साथ ही, कार्य क्षेत्र और वातावरण की हवा में औद्योगिक रासायनिक एलर्जी के लिए स्वच्छ मानकों को प्रमाणित करने के लिए एक एकीकृत दृष्टिकोण प्रदान किया जाता है।

रासायनिक यौगिकों और उन पर आधारित जटिल उत्पादों के लिए स्वच्छ मानक स्थापित करते समय एलर्जी के खतरे का आकलन निम्नलिखित मामलों में किया जाना चाहिए:

रासायनिक वर्गों से संबंधित नए रासायनिक यौगिकों का राशनिंग करते समय जिनका एलर्जी संबंधी अध्ययन नहीं किया गया है;

रासायनिक यौगिकों और रासायनिक वर्गों से संबंधित जटिल उत्पादों की राशनिंग करते समय, जिनमें पहले से ही ज्ञात एलर्जेन होते हैं, या ऐसे रासायनिक एनालॉग होते हैं जिनका संवेदीकरण प्रभाव होता है;

यदि आपको कोई एलर्जी संबंधी शिकायत है या चिकत्सीय संकेतइस रासायनिक यौगिक या उत्पाद के संपर्क में आने वाले लोगों में एलर्जी संबंधी घाव।

^ 2. अनुसंधान डिजाइन की योजना

अनुसंधान दो चरणों में किया जाता है। पहले चरण का लक्ष्य अध्ययन के तहत पदार्थ के एलर्जीनिक गुणों की पहचान करना है, दूसरे चरण का लक्ष्य स्वच्छता मानक के मूल्य को प्रमाणित करना है (आरेख देखें)।

अनुसंधान के पहले चरण में, गिनी सूअरों और चूहों के व्यक्त संवेदीकरण के तरीकों का उपयोग किया जाता है।

^ अनुसंधान डिजाइन योजना

चरण I - एलर्जेनिक गुणों की पहचान

चरण II - स्वच्छता मानक के मूल्य का औचित्य

A. सादृश्य द्वारा सामान्यीकरण

^ बी. त्वरित और पूर्ण योजना के अनुसार राशनिंग

सरल रासायनिक यौगिकों का अध्ययन करते समय, कान क्षेत्र में गिनी सूअरों को आंतरिक रूप से संवेदनशील बनाने और/या चूहों में विलंबित-प्रकार की अतिसंवेदनशीलता (बाद में डीटीएच के रूप में संदर्भित) को पुन: उत्पन्न करने की विधि का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है।

रासायनिक एलर्जी की कार्रवाई के लिए प्रयोगशाला जानवरों की सबसे संवेदनशील प्रजाति के रूप में गिनी सूअरों का संवेदीकरण, अध्ययन किए जा रहे पदार्थ की एलर्जीनिक गतिविधि का आकलन करना संभव बनाता है। इस प्रयोजन के लिए, जानवरों को कान क्षेत्र में पदार्थ की दो खुराकें देकर संवेदनशील बनाया जाता है: 50 और 200 μg/पशु। चूहों में एचआरटी का पुनरुत्पादन न केवल घुलनशील, बल्कि मजबूत या मध्यम एलर्जेनिक गतिविधि वाले पानी-अघुलनशील ठोस और पेस्ट जैसे पदार्थों के एलर्जेनिक गुणों की पहचान करना संभव बनाता है। चूंकि चूहों में कमजोर एलर्जी के परिचय से स्पष्ट रूप से परिभाषित एचआरटी का विकास नहीं होता है, यदि चूहों पर इस प्रयोग का परिणाम नकारात्मक या संदिग्ध है, तो गिनी सूअरों को 200 एमसीजी/पशु की खुराक पर अतिरिक्त रूप से संवेदनशील बनाया जाना चाहिए। साथ ही, कथित कमजोर एलर्जेनिक गतिविधि वाले पदार्थों के लिए, इससे भी अधिक संवेदनशील खुराक - 500 एमसीजी / पशु - के उपयोग से इंकार नहीं किया जा सकता है। जटिल और बिना इलाज वाले पॉलिमर उत्पादों का अध्ययन करते समय, गिनी सूअरों का संयुक्त संवेदीकरण किया जाता है (कान की त्वचा में और अतिरिक्त रूप से एपिक्यूटेनियस रूप से) और/या चूहों में एचआरटी को पुन: उत्पन्न करने की विधि का उपयोग किया जाता है।

चरण I अनुसंधान के इन अनिवार्य तरीकों के अलावा, उचित संकेतों के लिए जानवरों को संवेदनशील बनाने के अन्य तरीकों का भी उपयोग किया जा सकता है। इस प्रकार, रासायनिक यौगिकों और उत्पादों का अध्ययन करते समय, विशेष रूप से पेस्टी और चिपचिपे वाले, प्रदूषणकारी होते हैं त्वचाश्रमिकों को गिनी सूअरों पर बार-बार एपिक्यूटेनियस अनुप्रयोगों की विधि का उपयोग करके संपर्क एलर्जी विकसित होने की संभावना की जांच करने की सलाह दी जाती है। पानी में अघुलनशील औद्योगिक धूल के लिए, पहले से ही अध्ययन के पहले चरण में, सफेद चूहों के इंट्राट्रैचियल संवेदीकरण की एक विधि लागू की जा सकती है।

यदि अध्ययन के पहले चरण में अध्ययन किए गए पदार्थ के एलर्जीनिक गुणों की पहचान नहीं की जाती है, तो इसे सामान्य विषाक्त क्रिया वाले पदार्थ के रूप में मानकीकृत किया जाता है। यदि संवेदीकरण तकनीकों में से कम से कम एक में अध्ययन के तहत पदार्थ के एलर्जीनिक गुणों का पता चला है, तो अनुसंधान का दूसरा चरण पूरा किया जाना चाहिए।

अनुसंधान के दूसरे चरण में, मानकीकरण विधि (सादृश्य, त्वरित या पूर्ण योजना के अनुसार) के आधार पर, निम्नलिखित विष विज्ञान और एलर्जी संबंधी प्रयोग शामिल हैं।

सादृश्य द्वारा मानकीकरण करते समय, पहले चरण के व्यक्त संवेदीकरण के तरीकों का उपयोग करके, संदर्भ एलर्जेन और अध्ययन किए गए पदार्थ की शुरूआत के कारण जानवरों में संवेदीकरण की गंभीरता और आवृत्ति की तुलना की जाती है। अघुलनशील धूलों की राशनिंग करते समय, सफेद चूहों के इंट्राट्रैचियल संवेदीकरण का उपयोग करना भी संभव है। सरल रासायनिक यौगिकों के लिए, संदर्भ एलर्जेन पहले से ही मानकीकृत पदार्थ है, जो इसकी रासायनिक संरचना के समान है और इसमें संवेदीकरण के विकास के लिए जिम्मेदार समान सक्रिय एजेंट शामिल हैं। रासायनिक समूह. एक जटिल संरचना के लिए संदर्भ एलर्जेन पहले से ही मानकीकृत संरचना है, जो संरचना में समान है और इसमें संवेदीकरण के विकास के लिए जिम्मेदार समान घटक शामिल हैं।

संदर्भ एलर्जेन की अनुपस्थिति में, अनुसंधान के दूसरे चरण में संवेदीकरण सीमा का प्रयोगात्मक निर्धारण शामिल है: पदार्थ के एक ही साँस के साथ - लिम सेंस एसी, बार-बार साँस लेने के साथ - लिम सेंस चौधरी. मूल्यों की तुलना लिम सेंस एसीऔर लिम सेंस चौधरीसाथ लिम एसीऔर लिम चौधरीअभिन्न और विशिष्ट प्रभावों पर विष विज्ञान प्रयोगों में स्थापित, हमें यह निर्धारित करने की अनुमति देता है कि क्या संवेदीकरण प्रभाव सीमित है। इन आंकड़ों को ध्यान में रखते हुए, स्वच्छता मानक का मूल्य उचित है (धारा 6 देखें)।

जब राशनिंग कॉम्प्लेक्स रासायनिक उत्पादसंपूर्ण उत्पाद का उपयोग करके अध्ययन के दोनों चरणों में जानवरों को संवेदनशील बनाया जाता है; जब संवेदीकरण का पता चलता है, तो सभी मुख्य सामग्रियों का उपयोग परीक्षण के लिए किया जाता है शुद्ध फ़ॉर्म, और यदि रचना अज्ञात है, तो संपूर्ण उत्पाद या उसका अर्क (धारा 5.3 देखें)।

^ 3. एलर्जेनिक गुणों की पहचान के लिए अनुसंधान करना

3.1. गिनी सूअरों का अंतःत्वचीय संवेदीकरण

प्रयोग में 250 - 300 ग्राम वजन वाले युवा गिनी सूअरों का उपयोग किया जाता है, जिन्हें 2 प्रायोगिक और 8 - 10 जानवरों के एक सामान्य नियंत्रण समूह में विभाजित किया गया है। प्रायोगिक समूहों के जानवरों को 0.02 - 0.1 की मात्रा में अध्ययन किए गए पदार्थ के 50 (प्रथम प्रायोगिक समूह) और 200 μg प्रति जानवर (द्वितीय प्रायोगिक समूह) के आधार के करीब कान की बाहरी सतह की त्वचा में एक बार इंजेक्ट करके संवेदनशील बनाया जाता है। एमएल. आसुत जल, खारा, एसीटोन, अल्कोहल, ट्वीन-80, डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड, आदि का उपयोग विलायक के रूप में किया जाता है। तैलीय उत्पादों का अध्ययन करते समय, जलीय इमल्शन का उपयोग किया जाता है, और ठीक किए गए पॉलिमर के लिए, अर्क का उपयोग किया जाता है (धारा 5.3 देखें)। नियंत्रण जानवरों को समान मात्रा में विलायक, इमल्सीफायर या निकालने वाले तरल का इंजेक्शन लगाया जाता है।

संवेदीकरण का पता लगाना (धारा 5 देखें) 8-10 दिनों के बाद किया जाता है। दोनों खुराकों में मजबूत एलर्जी गिनी सूअरों में स्पष्ट संवेदनशीलता का कारण बनती है: एलर्जी संबंधी परीक्षणों का समूह औसत सांख्यिकीय रूप से नियंत्रण जानवरों से काफी अलग है। मध्यम एलर्जी केवल तभी स्पष्ट संवेदीकरण का कारण बनती है जब प्रति जानवर 200 एमसीजी की खुराक दी जाती है, और जब प्रति जानवर 50 एमसीजी की खुराक दी जाती है - कमजोर, जिसमें 1/3 - 1/2 जानवरों में संवेदनशीलता का पता लगाया जाता है, और एलर्जी संबंधी परीक्षणों के औसत समूह संकेतक नियंत्रण जानवरों से भिन्न नहीं हो सकते हैं। कमजोर एलर्जेंस केवल हल्के संवेदीकरण का कारण बनते हैं जब पदार्थ को प्रति जानवर 200 एमसीजी की खुराक पर प्रशासित किया जाता है, और केवल रक्त कोशिका परीक्षण सकारात्मक हो सकते हैं, और त्वचा परीक्षण नकारात्मक हो सकते हैं।

^ 3.2. गिनी सूअरों का संयुक्त संवेदीकरण

जटिल उत्पाद और सिद्ध पॉलिमर बहुत खराब तरीके से अवशोषित हो सकते हैं, ऐसी स्थिति में कान की त्वचा में 200 एमसीजी/जीवित इंजेक्शन लगाने पर भी गिनी सूअरों में संवेदीकरण नहीं होता है। एलर्जेनिक गुणों की उपस्थिति के बारे में अंतिम निर्णय लेने के लिए, यदि जानवरों के एलर्जी संबंधी परीक्षण के परिणाम नकारात्मक हैं, तो पदार्थ का एपिक्यूटेनियस अनुप्रयोग अगले दिन से शुरू होता है। 7वें आवेदन के बाद, गिनी सूअरों का फिर से परीक्षण किया जाता है।

एपिक्यूटेनियस अनुप्रयोगों के लिए पदार्थ की सांद्रता का चयन त्वचा में जलन पैदा करने वाले प्रभाव का अध्ययन करने की प्रक्रिया में या एक विशेष प्रयोग में किया जाता है: 250 - 300 ग्राम वजन वाले 6 - 8 गिनी सूअरों को 7 - 10 दिनों के लिए (सप्ताह में 5 बार) 3 बूँदें दी जाती हैं अध्ययन किए गए पदार्थ और उसके तनुकरण 1:2, 1:10 और 1:100 को शरीर की पार्श्व सतह की 2 x 2 सेमी की छंटनी वाली "खिड़कियों" पर। एक वाष्पशील विलायक का उपयोग करना सुविधाजनक है जो त्वचा को परेशान नहीं करता है (एसीटोन, 70° अल्कोहल, डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड) एक विलायक के रूप में। यदि कोई फिल्म बन जाती है, तो उसे 4 घंटे के बाद धो दिया जाता है; अन्य मामलों में, त्वचा को किसी भी चीज़ से उपचारित नहीं किया जाता है। मलहम अघुलनशील पदार्थों (अधिमानतः पेट्रोलियम जेली के बजाय लैनोलिन के साथ) से तैयार किए जाते हैं, जिन्हें "खिड़की" की सतह पर एक आंख के स्पैटुला के साथ वितरित किया जाता है। संवेदीकरण के लिए, अधिकतम सांद्रता चुनें जो संपर्क जिल्द की सूजन के विकास का कारण न बने।

^ 3.3. चूहों में एचआरटी का निर्धारण

प्रयोगात्मक और नियंत्रण समूहों में से प्रत्येक में 10 शुद्ध-रेखा चूहे (BALB/C, CA-1, DVA/2) या 16-20 सफेद आउटब्रेड चूहे शामिल थे जिनका वजन 18-20 ग्राम था। जानवरों को 10 मिमी या 100 μg के साथ संवेदनशील बनाया गया था पूंछ के आधार में एक बार त्वचा के अंदर पदार्थ का परीक्षण करें। पदार्थ की संवेदी खुराक को 1:1 के अनुपात में तैयार किए गए फ्रायंड के पूर्ण सहायक (पीएएफ) और हैंक्स के घोल पीएच 7.5 के मिश्रण के 60 μl में इमल्सीकृत किया जाता है। पीएएफ संरचना: 1 मिली लैनोलिन, 3 मिली वैसलीन तेल, 5 मिलीग्राम हीट-किल्ड बीसीजी वैक्सीन। पीएएफ की इस मात्रा में 50 μl ट्वीन-20 और 0.5 मिली आसुत जल मिलाएं। मिश्रण आटोक्लेव्ड है. नियंत्रण जानवरों को परीक्षण पदार्थ मिलाए बिना इस मिश्रण के 60 μl का इंजेक्शन लगाया जाता है।

संवेदीकरण का पता लगाने के लिए, 5 दिनों के बाद, हैंक्स के घोल में घुले (निलंबित) परीक्षण पदार्थ की समान मात्रा (10 मिमी या 100 μg) को चूहों के पिछले पंजा पैड में इंजेक्ट किया जाता है जैसा कि संवेदीकरण के दौरान किया जाता है। 24 घंटों के बाद, एमके-0-25 इंजीनियरिंग माइक्रोमीटर का उपयोग करके दोनों पिछले पंजों की मोटाई मिमी में मापें। एडिमा की मात्रा के बारे में, अर्थात्। एचआरटी के विकास का आकलन दोनों पिछले पैरों की मोटाई (एचआरटी संकेतक) में अंतर से किया जाता है। नियंत्रित जानवरों में, यह आमतौर पर 0.04 - 0.09 मिमी होता है। नियंत्रित पशुओं की तुलना में प्रायोगिक पशुओं में समूह औसत एचआरटी सूचकांक की सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण अधिकता अध्ययन किए गए यौगिक के स्पष्ट या मध्यम संवेदीकरण गुणों की उपस्थिति को इंगित करती है।

^ 3.4. गिनी सूअरों पर एकाधिक एपिक्यूटेनियस अनुप्रयोग

संवेदीकरण सांद्रता का चयन उसी तरह किया जाता है जैसे संयुक्त संवेदीकरण के लिए किया जाता है (धारा 3.2 देखें)। एपिक्यूटेनियस अनुप्रयोग 4 सप्ताह के लिए सप्ताह में 5 बार किए जाते हैं (कुल 20 अनुप्रयोग)। यदि प्रयोग के दूसरे-तीसरे सप्ताह में गिनी पिग संपर्क जिल्द की सूजन के लक्षण दिखाते हैं, तो त्वचा के दूसरे क्षेत्र पर संवेदीकरण अनुप्रयोग जारी रहते हैं। अंतिम आवेदन के 1-2 दिन बाद संवेदनशीलता का पता चलता है। इस मामले में, ड्रॉप स्किन टेस्ट विपरीत दिशा में किया जाता है।

^ 4. स्वच्छता मानकों के मूल्य को प्रमाणित करने के लिए अनुसंधान करना

4.1. सफेद चूहों का इंट्राट्रैचियल संवेदीकरण

सफेद चूहों के दो समूहों को 37 डिग्री सेल्सियस तक गर्म किए गए शारीरिक समाधान में 50 और 10 मिलीग्राम की खुराक में सबसे कुचली हुई धूल के 0.5 - 1.0 मिलीलीटर निलंबन के साथ श्वासनली में एक बार इंजेक्ट किया जाता है। नियंत्रण समूह के जानवरों को 37 डिग्री सेल्सियस तक गर्म किए गए 1 मिलीलीटर शारीरिक घोल का इंजेक्शन लगाया गया।

एनेस्थीसिया के बिना प्रशासन प्रक्रिया को अंजाम देना बेहतर है। ऐसा करने के लिए, चूहे को अंदर स्थापित कर दिया जाता है ऊर्ध्वाधर स्थिति, में प्रवेश मुंहसस्पेंशन की उचित खुराक के साथ एक सिरिंज से जुड़ी एक धातु जांच को ग्लोटिस (रुकावट की अनुभूति प्रकट होती है) के माध्यम से स्वरयंत्र की पूर्वकाल की दीवार के साथ तब तक गुजारा जाता है जब तक कि यह श्वासनली द्विभाजन पर रुक न जाए, जांच को थोड़ा ऊपर उठाया जाता है और डाला जाता है। प्रशासन के बाद, जानवर को कई दिनों तक सीधी स्थिति में रखा जाता है साँस लेने की गतिविधियाँ. इस मामले में, घरघराहट और कर्कश ध्वनियाँ फेफड़ों में निलंबन के प्रवेश की पुष्टि करती हैं।

इंट्राट्रैचियल प्रशासन के 5 दिन बाद सभी समूहों के जानवरों का परीक्षण किया जाता है।

^ 4.2. एकल साँस लेना जोखिम

मूल्य निर्धारित करने के लिए किसी पदार्थ का एकल अंतःश्वसन लिम सेंस ए.सीमूल्य जानने के बाद गिनी पिग या सफेद चूहों पर परीक्षण करने की सलाह दी जाती है लिम एसी. कमजोर और मध्यम एलर्जी के लिए, आमतौर पर सक्रिय, थ्रेशोल्ड के स्तर पर और सामान्य विषाक्त प्रभाव की तुलना में कम परिमाण के स्तर पर अध्ययन के तहत पदार्थ को अंदर लेना पर्याप्त होता है। मजबूत एलर्जी का अध्ययन करते समय, कम सांद्रता में साँस लेना भी आवश्यक है। कार्य क्षेत्र में हवा के लिए मानक स्थापित करते समय प्रत्येक साँस लेने की अवधि 4 घंटे और वायुमंडलीय हवा के लिए 24 घंटे है। समूह में जानवरों की संख्या कम से कम 10 होनी चाहिए।

चूहों पर एकल साँस लेना चाहिए ताकि मूल्यों की तुलना की जा सके लिम सेंस ए.सीऔर लिम एसीएक पशु प्रजाति से प्राप्त किया गया। हालाँकि, यदि एक भी साँस लेने से चूहों में संवेदीकरण नहीं होता है, तो इसे गिनी सूअरों में दोहराया जाना चाहिए।

साँस लेने के एक सप्ताह बाद संवेदनशीलता का पता चलता है।

पीछे लिम सेंस ए.सीकिसी पदार्थ की सांद्रता लें, जिसके एक बार साँस लेने से 10 में से 2-5 जानवरों में संवेदनशीलता पैदा हो जाती है, जो सकारात्मक प्रयोगशाला परीक्षणों और/या उत्तेजक परीक्षणों द्वारा प्रकट होता है। इस मामले में, संवेदीकरण संकेतकों के समूह औसत मूल्य नियंत्रण संकेतकों से सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण रूप से भिन्न नहीं हो सकते हैं।

^ 4.3. बार-बार साँस लेना जोखिम

बार-बार साँस लेना उसी प्रजाति के जानवरों पर किया जाता है जिस पर यह स्थापित किया गया था लिम सेंस ए.सी. एक्सपोज़र की अवधि है: जब कार्य क्षेत्र की हवा में अधिकतम अनुमेय सांद्रता स्थापित हो जाती है, तो प्रतिदिन 4 घंटे, 2 सप्ताह के लिए सप्ताह में 5 बार; वायुमंडलीय हवा में अधिकतम अनुमेय सांद्रता के लिए, 14 दिन लगातार (दौर- द-क्लॉक) एक्सपोज़र। तदनुसार, 2 सप्ताह के बाद जानवरों का पहला परीक्षण किया जाता है। यदि परिणाम नकारात्मक या संदिग्ध है, तो उसी क्रम में अगले 2 सप्ताह तक साँस लेना जारी रखा जाता है और पुनः परीक्षण किया जाता है। कार्य क्षेत्र की हवा में अधिकतम अनुमेय सांद्रता स्थापित करते समय कुल अवधिएक्सपोज़र एक महीने से अधिक नहीं होना चाहिए, और वायुमंडलीय हवा के लिए प्रयोग 2 महीने तक जारी रखा जा सकता है। लंबे समय तक संपर्क में रहने की सलाह नहीं दी जाती है, क्योंकि इससे संवेदीकरण प्रभाव में वृद्धि नहीं होती है। इसके अलावा, बाद में साँस लेने से प्रतिपूरक प्रतिरक्षा प्रक्रियाओं के विकास के कारण प्रभाव कमजोर हो सकता है और थ्रेशोल्ड एकाग्रता का निर्धारण काफी जटिल हो जाएगा। इस प्रकार, इसके प्रभाव में 2-4 सप्ताह का प्रयोग, सिद्धांत रूप में, एक क्रोनिक टॉक्सिकोलॉजिकल प्रयोग के बराबर है, जो मूल्यों की तुलना करने की अनुमति देता है लिम चौधरीऔर लिम सेंस चौधरी .

संवेदीकरण प्रभाव के लिए दहलीज एकाग्रता का निर्धारण ( लिम सेंस च) एकल इनहेलेशन एक्सपोज़र के समान सिद्धांतों के अनुसार किया जाता है।

^ 5. संवेदीकरण का पता लगाने के तरीके

यह दस्तावेज़ उन तरीकों की सिफ़ारिश करता है जिनका संवेदीकरण का पता लगाने के लिए विष विज्ञान अभ्यास में व्यापक रूप से परीक्षण किया गया है रासायनिक यौगिकऔर उत्पाद: इन विट्रो में एलर्जेन के प्रति रक्त कोशिकाओं की प्रतिक्रिया के आधार पर त्वचा उत्तेजक परीक्षण और प्रयोगशाला विशिष्ट एलर्जी परीक्षण। ये परीक्षण एलर्जी प्रतिक्रियाओं का पता लगा सकते हैं अलग - अलग प्रकार: धीमी (उत्तेजक टपकाव)। त्वचा परीक्षण), तत्काल रीगिन प्रकार (मस्तूल कोशिका परीक्षण), साथ ही अप्रत्यक्ष प्रतिरक्षा परिसरों(ल्यूकोसाइट्स का विश्लेषण और रक्त न्यूट्रोफिल के साथ परीक्षण)। अनुशंसित परीक्षणों को अनुसंधान पहल को सीमित नहीं करना चाहिए, क्योंकि यह विशिष्ट एलर्जी निदान और गैर-विशिष्ट दोनों के अन्य तरीकों का उपयोग करने के लिए वैध है, जो प्रायोगिक जानवरों (इम्यूनोलॉजिकल, बायोकेमिकल, इम्यूनोमॉर्फोलॉजिकल, आदि) में संवेदीकरण के विकास का संकेत देता है।

^ 5.1. गिनी सूअरों पर उत्तेजक त्वचा ड्रिप परीक्षण

त्वचा ड्रिप परीक्षण (बाद में एसपी के रूप में संदर्भित) करने के लिए, परीक्षण एकाग्रता और अध्ययन के तहत पदार्थ का प्रारंभिक चयन बरकरार गिनी सूअरों (6 - 8 व्यक्तियों) के समूह पर किया जाता है। ऐसा करने के लिए, जानवर के शरीर की पार्श्व सतहों पर, बालों को 1 x 1 सेमी मापने वाले 4 से 8 क्षेत्रों में काटा जाता है, ऊन की पट्टियों से अलग किया जाता है। एक निश्चित सांद्रता वाले पदार्थ की 1-3 बूंदें संबंधित क्षेत्र पर लगाएं। आमतौर पर पदार्थ का परीक्षण उसके मूल रूप में और उसके दोहरे या दस गुना तनुकरण में किया जाता है। पानी, 70° अल्कोहल, एसीटोन और डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड का उपयोग विलायक (मंदक) के रूप में किया जाता है। इस मामले में, त्वचा के क्षेत्रों में से एक पर नियंत्रण होना चाहिए, जिस पर उचित विलायक (मंदक) लगाया जाता है। प्रतिक्रिया का मूल्यांकन 24 घंटों के बाद दृष्टिगत रूप से किया जाता है।

परीक्षण एकाग्रता के रूप में, अधिकतम एकाग्रता का चयन करें, जिसे बरकरार गिनी सूअरों की त्वचा पर लगाने से 24 घंटों के बाद जलन प्रतिक्रिया (एरिथेमा, सूजन) नहीं होती है।

सीपी की स्थापना. परीक्षण सांद्रण में परीक्षण पदार्थ की 1 बूंद गिनी पिग (प्रायोगिक और नियंत्रण) के किनारों की बाल रहित त्वचा पर लागू की जाती है। निम्नलिखित पैमाने का उपयोग करके 24 घंटों के बाद प्रतिक्रिया का आकलन किया जाता है:

0 अंक - कोई दृश्यमान प्रतिक्रिया नहीं;

1 बिंदु - पूरे क्षेत्र में या परिधि पर हल्का गुलाबी एरिथेमा;

2 अंक - पूरे क्षेत्र में या परिधि पर चमकीला गुलाबी एरिथेमा;

3 अंक - पूरे क्षेत्र में चमकदार लाल एरिथेमा;

4 अंक - एरिथेमा के साथ या उसके बिना त्वचा की सूजन;

5 अंक - गंभीर सूजन, फोकल अल्सरेशन, रक्तस्राव।

^ 5.2. उत्तेजक कान सूजन परीक्षण

टीओयू के लिए परीक्षण सांद्रता का चयन, सिद्धांत रूप में, सीपी के लिए उससे अलग नहीं है: समान सॉल्वैंट्स (एसीटोन, 70° अल्कोहल) और पदार्थ के तनुकरण का उपयोग किया जाता है (0.1 से 20% तक, कम अक्सर 50% या बिना पतला उत्पाद)। हालाँकि, जानवरों की कुल संख्या में वृद्धि हुई है, क्योंकि एक जानवर पर केवल दो सांद्रता (प्रत्येक कान के लिए एक) का परीक्षण किया जा सकता है।

टीओयू सेट करना: सबसे पहले मध्य भाग की मोटाई को मिमी में माइक्रोमीटर से मापें कर्ण-शष्कुल्ली, फिर एक कामकाजी एकाग्रता में परीक्षण पदार्थ का 25 μl कान के मध्य तीसरे की दोनों सतहों पर लगाया जाता है, सीधा किया जाता है और चिमटी के साथ तय किया जाता है। 24 घंटों के बाद, कान की मोटाई फिर से मापी जाती है और आवेदन से पहले और बाद में मोटाई में अंतर से टीओयू सूचकांक की गणना की जाती है। गिनी सूअरों और चूहों में टीओसी को सकारात्मक माना जाता है जब यह 0.03 मिमी या अधिक होता है, चूहों में - 0.01 मिमी या अधिक होता है। गिनी सूअरों में, टीओयू को निम्नलिखित पैमाने पर अंकों में गिना जा सकता है:

0 अंक - 0.03 मिमी तक;

1 अंक - 0.03 - 0.07 मिमी;

2 अंक - 0.08 - 0.12 मिमी;

3 अंक - 0.13 - 0.17 मिमी;

4 अंक - 0.18 - 0.22 मिमी;

5 अंक - 0.23 मिमी या अधिक।

^ 5.3. पशु रक्त कोशिकाओं के साथ विशिष्ट एलर्जी परीक्षण करने के लिए पदार्थ की कार्यशील खुराक का चयन

रक्त कोशिकाओं के साथ विशिष्ट एलर्जी परीक्षण, एक नियम के रूप में, 0.1 - 0.01% समाधान (खारा) के साथ किए जाते हैं, इसलिए वे खराब घुलनशील पदार्थों का उपयोग कर सकते हैं। ऐसे पदार्थों के लिए जो इतनी सांद्रता में भी पानी में अघुलनशील होते हैं, एक पानी में घुलनशील पदार्थ जिसमें एक समूह एंटीजेनिक निर्धारक होता है, का चयन किया जाना चाहिए: उदाहरण के लिए, फॉर्मेल्डिहाइड युक्त बहुलक उत्पादों के लिए - फॉर्मेल्डिहाइड समाधान; एपॉक्सी समूहों वाले बहुलक उत्पादों के लिए - एपिक्लोरोहाइड्रिन; सभी क्रोमियम यौगिकों के लिए - CrCl 3; धातु Be और उसके यौगिकों के लिए - बेरिलियम सल्फेट, आदि। ठीक किए गए पॉलिमर का अध्ययन करते समय, एक अर्क का उपयोग किया जाता है: अध्ययन के तहत पदार्थ और शारीरिक समाधान, पॉलिमराइजेशन उत्पादों के लिए 1: 1 के अनुपात में और 3 - 5 दिनों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन के साथ पॉलीकंडेनसेशन उत्पादों के लिए 1:10 के अनुपात में।

तकनीकी उत्पादों से नहीं, बल्कि रासायनिक रूप से शुद्ध पदार्थों से समाधान तैयार करने की सलाह दी जाती है। चूंकि अम्लीय या क्षारीय वातावरण रक्त कोशिकाओं को नुकसान पहुंचा सकता है, इसलिए आपको यह सुनिश्चित करना चाहिए कि कार्यशील समाधान का पीएच तटस्थ या थोड़ा क्षारीय (पीएच 7.2 - 7.4) है। यदि कोई पदार्थ अस्थिर समाधान बनाता है, तो प्रत्येक प्रयोग के लिए कार्यशील समाधान तैयार किया जाना चाहिए। स्थायी समाधानों को रेफ्रिजरेटर में एक महीने तक संग्रहीत किया जा सकता है, लेकिन उनकी बाँझपन सुनिश्चित करने के लिए सावधानी बरतनी चाहिए और यदि समाधान बादल बन जाता है या एक फिल्म बनाता है, तो समाधान का उपयोग नहीं किया जा सकता है।

परीक्षण किए गए पदार्थों की कार्यशील खुराक (समाधान की सांद्रता) का चयन कई तनुकरणों का उपयोग करके अक्षुण्ण जानवरों के रक्त के साथ परीक्षण करके किया जाता है। संवेदीकरण की पहचान करने के लिए, समाधान की अधिकतम सांद्रता का चयन करें जो केवल एक एंटीकोआगुलेंट के अतिरिक्त नियंत्रण नमूने की तुलना में परीक्षण के अनुरूप रक्त कोशिकाओं में लसीका या अन्य परिवर्तनों में वृद्धि का कारण नहीं बनता है।

^ 5.4. रक्त ल्यूकोसाइट्स की विशिष्ट लसीका प्रतिक्रिया

विकल्प 1. पहली टेस्ट ट्यूब या टैबलेट के कुएं में 0.1 मिली फिजियोलॉजिकल सॉल्यूशन (नियंत्रण नमूना) मिलाएं, और दूसरी ट्यूब में 0.1 मिली फिजियोलॉजिकल सॉल्यूशन डालें, जिसमें टेस्ट पदार्थ की एक कार्यशील खुराक पहले से घुली हुई है (टेस्ट) नमूना)। फिर दोनों ट्यूबों में 0.1 मिलीलीटर परीक्षण रक्त डाला जाता है। प्रतिक्रियाशील प्रणालियों को हिलाकर मिश्रित किया जाता है और 37 डिग्री सेल्सियस पर 2 घंटे के लिए ऊष्मायन किया जाता है। प्रत्येक रक्त के नमूने से, 0.02 मिलीलीटर को क्रमशः दो टेस्ट ट्यूबों या एक प्लेट के कुओं में स्थानांतरित किया जाता है, जिसमें लाल रक्त कोशिकाओं को नष्ट करने के लिए एसिटिक एसिड के 3% जलीय घोल का 0.4 मिलीलीटर होता है।

विकल्प 2. प्रायोगिक जानवरों के खून को 0.5 मार्क तक दो मेलेंजूर में खींचा जाता है, फिर शारीरिक घोल में तैयार सोडियम साइट्रेट का 5% घोल पहले मेलेंजूर में मार्क 1 (नियंत्रण नमूना) तक मिलाया जाता है, दूसरे में ( उसी चिह्न तक I) - सोडियम साइट्रेट का 5% समाधान, जिसमें परीक्षण पदार्थ की एक कार्यशील खुराक पूर्व-भंग होती है (परीक्षण नमूना)। मेलेंजर्स को हिलाया जाता है और 2 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट किया जाता है। फिर मेथिलीन नीले रंग से रंगा हुआ एसिटिक एसिड का 3-5% जलीय घोल, मार्क II तक दोनों मेलेंजर्स में मिलाया जाता है।

ल्यूकोसाइट्स की पूर्ण संख्या की गणना की जाती है गिनती कक्षरक्त या पिकास्केल. मेलेंजर्स का उपयोग करते समय, कक्ष को भरने से पहले 3-4 बूंदें निकाली जाती हैं।

आरएसएलएल संकेतक की गणना सूत्र का उपयोग करके की जाती है:

जब ल्यूकोसाइट लसीका दर 10% या अधिक हो तो प्रतिक्रिया सकारात्मक मानी जाती है। 20% से ऊपर का आरएसएलएल संकेतक इंगित करता है उच्च स्तरपशु संवेदीकरण.

रासायनिक एलर्जी की कार्यशील सांद्रता बरकरार जानवरों के 9% से अधिक ल्यूकोसाइट्स के लसीका का कारण नहीं होनी चाहिए और अक्सर शारीरिक समाधान में 0.5 - 0.05% तनुकरण के अनुरूप होती है; उन पदार्थों के लिए उच्च तनुकरण की आवश्यकता होती है जिनमें स्पष्ट उत्तेजना होती है और इसलिए, रक्त कोशिकाओं पर साइटोटोक्सिक प्रभाव होता है।

^ 5.5. न्यूट्रोफिल को विशिष्ट क्षति की प्रतिक्रिया

न्यूट्रोफिल (बाद में पीपीएन परीक्षण के रूप में संदर्भित) को विशिष्ट क्षति की प्रतिक्रिया का परीक्षण करने के लिए, सोडियम साइट्रेट का 5% जलीय घोल या शारीरिक समाधान में तैयार 1.5% ईडीटीए समाधान (चेलाटन -3) का उपयोग एंटीकोआगुलेंट (निगरानी) के रूप में किया जाता है। समाधान का पीएच)।

अध्ययन किए जा रहे पदार्थ की कार्यशील सांद्रता उसी एंटीकोआगुलेंट का उपयोग करके तैयार की जाती है जिसे रक्त में जोड़ा जाता है। कार्यशील सांद्रता से पीपीएन परीक्षण के पहले संस्करण में अक्षुण्ण पशुओं में 4% से अधिक न्यूट्रोफिल और दूसरे संस्करण में 7% से अधिक की क्षति नहीं होनी चाहिए।

पीपीएन परीक्षण की स्थापना। कार्यशील सांद्रता में परीक्षण पदार्थ के घोल का 0.1 - 0.2 मिलीलीटर पहले सिलिकॉनयुक्त सेंट्रीफ्यूज ट्यूब (परीक्षण नमूना) में जोड़ा जाता है, और केवल एंटीकोआगुलेंट की समान मात्रा दूसरे (नियंत्रण नमूना) में डाली जाती है। फिर जांच किए जा रहे जानवर के रक्त की समान मात्रा को दोनों टेस्ट ट्यूबों में जोड़ा जाता है, जिसके बाद टेस्ट ट्यूबों को सावधानीपूर्वक मिलाया जाता है और कमरे के तापमान पर 1 घंटे के लिए रखा जाता है।

विकल्प 1. ऊष्मायन के अंत के बाद, कांच की स्लाइड पर दोनों ट्यूबों से मध्यम-मोटी स्मीयर तैयार किए जाते हैं, जिन्हें ल्यूकोसाइट फॉर्मूला की गणना करने के लिए स्मीयरों को धुंधला करने के लिए उपयोग की जाने वाली विधि का उपयोग करके तय किया जाता है और दाग दिया जाता है। विसर्जन के तहत, 100 न्यूट्रोफिल की गिनती की जाती है, जिसमें विशिष्ट क्रोमैटिनोलिसिस, पाइकोनोसिस, परमाणु विखंडन, हाइपरक्रोमैटोसिस या कैरियोलिसिस वाली कोशिकाओं की संख्या को ध्यान में रखा जाता है।

विकल्प 2. ऊष्मायन के अंत के बाद, सावधानीपूर्वक फिर से मिलाएं और दोनों टेस्ट ट्यूबों में एक्रिडीन ऑरेंज (1:20000) के कार्यशील जलीय घोल के 0.02 मिलीलीटर जोड़ें। इस घोल को रेफ्रिजरेटर में 2 सप्ताह से अधिक समय तक संग्रहीत नहीं किया जाता है। इसे तैयार करने के लिए, 1:100 के तनुकरण पर एक्रिडीन ऑरेंज के आयोडीन घोल का उपयोग करें, जिसे कई महीनों तक रेफ्रिजरेटर में एक अंधेरी बोतल में संग्रहीत किया जा सकता है। 5 मिनट के बाद, प्रत्येक टेस्ट ट्यूब से सामग्री की 1 बूंद को दो ग्लास स्लाइडों में स्थानांतरित किया जाता है, एक कवर ग्लास के साथ कवर किया जाता है और 3 - 5 मिनट के बाद विसर्जन के साथ LUMAM में जांच की जाती है। 100 न्यूट्रोफिल गिने जाते हैं, जो साइटोप्लाज्म की मंद हरी चमक की पृष्ठभूमि के खिलाफ रूबी कणिकाओं की प्रचुरता के कारण स्पष्ट रूप से पहचाने जाते हैं।

सामान्य, अक्षुण्ण न्यूट्रोफिल आकार में अंडाकार या गोल होते हैं। क्षतिग्रस्त न्यूट्रोफिल को विशिष्ट अमीबॉइड प्रोट्रूशियंस (सेल गतिशीलता में वृद्धि) और रूपात्मक परिवर्तनों (सेल के किनारों पर साइटोप्लाज्म के दुर्लभकरण की शुरुआत के साथ असमान "टूटे हुए" किनारों, साइटोप्लाज्म के रिक्तीकरण, गिरावट, क्रोमैटिन पैटर्न के मोटे होने से पहचाना जाता है। केंद्र)।

प्रतिक्रिया सूचकांक की गणना प्रयोगात्मक और नियंत्रण नमूनों में क्षतिग्रस्त न्यूट्रोफिल की संख्या में अंतर को 100 से विभाजित करके की जाती है। पहले विकल्प में 0.05 या उससे अधिक और दूसरे विकल्प में 0.08 या उससे अधिक का सूचक मान पशु के संवेदीकरण को इंगित करता है।

^ 5.6. विशिष्ट क्षरण प्रतिक्रिया मस्तूल कोशिकाओं

अध्ययन एनेस्थीसिया के तहत या जानवर के सिर काटने के तुरंत बाद किया जाता है। ऐसा करने के लिए, मध्य रेखा के साथ पेट की दीवार को खोलने के लिए कैंची का उपयोग करें और ध्यान से ( अपनी उंगलियों से बेहतररबर की उंगलियों में, चिमटी से नहीं) क्रमाकुंचन आंत के सबसे लंबे लूप (5 सेमी या थोड़ा अधिक) को बाहर निकालें। लूप को कांच की स्लाइड पर रखें ताकि मेसेंटरी के 3 बड़े खंड सामने आ जाएं। इसके बाद, आंतों के लूप का एक भाग दोनों तरफ से काट दिया जाता है, जिसके किनारों को कांच के किनारे से 0.5 सेमी ऊपर लटका देना चाहिए। फिर, पहले नियंत्रण दवा के प्रत्येक खंड पर 40 μl शारीरिक समाधान लगाया जाता है, और 20 μl ताजा ऑटोसेरम (हाइपोग्लोसल नस से लिए गए रक्त से अध्ययन के दिन तैयार किया जाता है) और कार्य में परीक्षण पदार्थ का 20 μl लगाया जाता है। दूसरी प्रायोगिक दवा के प्रत्येक खंड पर सांद्रण लागू किया जाता है। खारे घोल में तैयार किया जाता है। दोनों तैयारियों को 37 डिग्री सेल्सियस पर 5 मिनट के लिए इनक्यूबेट किया जाता है, झुके हुए कांच के किनारे को फिल्टर पेपर से ब्लॉट करके तरल चरण को हटा दिया जाता है और, यदि आवश्यक हो, तो मेसेंटरी को सावधानीपूर्वक फिर से सीधा किया जाता है। मिथाइल अल्कोहल (मे-ग्रुनवाल्ड के अनुसार) में 1 - 1.5 मिनट के लिए ईओसिन मेथिलीन डाई के 1% घोल को भरकर तैयारियों को तुरंत रंग दिया जाता है। थोड़ा झुके हुए उत्पाद को पिपेट के पानी से धोकर और हवा में पूरी तरह सूखने के लिए छोड़ कर (आमतौर पर 24 घंटे) पेंट को हटा दिया जाता है। एक सूखे नमूने का उपयोग करके, आंत के पूरे भाग और मेसेंटरी के क्षेत्रों के बीच के सेप्टम को एक स्केलपेल के साथ हटा दिया जाता है।

तैयारियों को विसर्जन (आवर्धन 10 x 80) के साथ सूक्ष्मदर्शी किया जाता है, 50 मस्तूल कोशिकाओं को तिरछे गिना जाता है, उनके बीच क्षतिग्रस्त रूपों को ध्यान में रखते हुए। क्षतिग्रस्त झिल्ली वाली मस्तूल कोशिकाएं और इसकी सीमा से परे कणिकाओं का निकलना (विघटन), साथ ही पूरी तरह से क्षतिग्रस्त कोशिकाओं को क्षतिग्रस्त माना जाना चाहिए। RDTK संकेतक की गणना सूत्र का उपयोग करके की जाती है:

यदि संकेतक 1.31 या अधिक है तो प्रतिक्रिया सकारात्मक मानी जाती है।

आरडीटीके के लिए रसायनों की कार्यशील सांद्रता अक्सर शारीरिक समाधान में 0.01 - 0.001% तनुकरण के अनुरूप होती है, जिसके प्रभाव में नियंत्रण जानवरों में डीटीसी संकेतक 1.0  0.3 से अधिक नहीं होना चाहिए।

^ 5.7. अप्रत्यक्ष मस्तूल कोशिका क्षरण प्रतिक्रिया

यह परीक्षण (इसके बाद आरएनटीडीसी के रूप में संदर्भित) प्रायोगिक जानवरों के रक्त सीरम और अध्ययन के तहत पदार्थ (एलर्जेन) में निहित एलर्जी एंटीबॉडी के इन विट्रो के संपर्क में लक्ष्य कोशिकाओं (सफेद चूहों की मस्तूल कोशिकाएं) की प्रतिक्रिया पर आधारित है।

मस्तूल कोशिकाओं का एक पूल प्राप्त करने के लिए, ईथर एनेस्थीसिया के तहत अक्षुण्ण सफेद चूहों को 6-10 मिलीलीटर शारीरिक समाधान को 37 डिग्री सेल्सियस तक गर्म करके, 0.5 मिलीलीटर हेपरिन के साथ मिलाकर इंट्रापेरिटोनियल रूप से इंजेक्ट किया जाता है। कैंची से पेट की दीवार की हल्की मालिश करने के बाद, पेट की मध्य रेखा के साथ 1.5-2.2 सेमी लंबा चीरा लगाएं, कटे हुए हिस्से के साथ शव को पलट दें और आंतों के छोरों से बहने वाले द्रव को हेपरिन से सिक्त अपकेंद्रित्र ट्यूब में इकट्ठा करें। . एक्सयूडेट को 5 मिनट तक सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। 1500 आरपीएम पर, सतह पर तैरनेवाला सूखा जाता है, और मस्तूल कोशिकाओं का निलंबन प्राप्त करने के लिए तलछट को मिलाया जाता है।

एनडीटीसी करने के लिए, मस्तूल कोशिकाओं के 0.05 मिलीलीटर निलंबन और जांच किए गए जानवर के सीरम के 0.05 मिलीलीटर को एक प्लेट या 2 टेस्ट ट्यूब के 2 कुओं में जोड़ा जाता है। फिर पहले नमूने (नियंत्रण) में 0.05 मिलीलीटर शारीरिक समाधान जोड़ा जाता है, दूसरे नमूने (प्रयोगात्मक) में 0.05 मिलीलीटर शारीरिक समाधान जोड़ा जाता है जिसमें अध्ययन किए गए पदार्थ की कार्यशील खुराक घुल जाती है (0.01 - 0.001% समाधान, जो होना चाहिए) लक्ष्य कोशिकाओं के 5% से अधिक को सहज क्षति न पहुँचाएँ)। फिर, प्रत्येक नमूने से एक बूंद को एक घटी हुई कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है, जिसे पहले वर्गों के रूप में कांच के 2 सिरों पर तटस्थ लाल रंग के 0.3% अल्कोहल समाधान के साथ दाग दिया जाता है और कमरे के तापमान पर सुखाया जाता है। प्रत्येक बूंद को कवरस्लिप से ढक दिया जाता है, जिसके किनारों पर वैसलीन लगाया जाता है, और 15 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट किया जाता है।

तैयारी की जांच 20 x 80 के आवर्धन पर सूक्ष्मदर्शी रूप से की जाती है। प्रत्येक तैयारी में, 50 मस्तूल कोशिकाओं की गिनती की जाती है। आरडीटीसी सेट करते समय आरडीटीसी संकेतक की गणना और उसका मूल्यांकन धारा 5.6 के अनुसार किया जाता है।

^ 5.8. संवेदीकरण का पता लगाने के परिणामों का मूल्यांकन

चरण I अध्ययन करते समय, संवेदीकरण के विकास की आवृत्ति और इसकी तीव्रता का उपयोग उपयोग किए गए सभी उत्तेजक और विशिष्ट एलर्जी संबंधी परीक्षणों के समूह औसत संकेतकों के अनुसार किया जाता है। अध्ययन के तहत पदार्थ की एलर्जीनिक गतिविधि का वर्ग तालिका के अनुसार निर्धारित किया जाता है। 1: वर्ग 1 में मजबूत एलर्जी कारक शामिल हैं, वर्ग 2 में मध्यम एलर्जी कारक शामिल हैं, और वर्ग 3 में कमजोर एलर्जी कारक शामिल हैं। यदि प्रभाव संवेदीकरण की आवृत्ति और विभिन्न उत्तेजक और/या विशिष्ट एलर्जी संबंधी परीक्षणों के समूह औसत संकेतकों के मूल्यों में भिन्न होता है, तो पदार्थ की एलर्जीनिक गतिविधि का आकलन सबसे स्पष्ट संकेतक के अनुसार किया जाता है।

तालिका नंबर एक

^ एलर्जेनिक गतिविधि की ताकत के अनुसार पदार्थों का वर्गीकरण

अनुसंधान के द्वितीय चरण के इनहेलेशन प्रयोगों का संचालन करते समय, प्रभावी एकाग्रता को वह माना जाता है जिस पर आधे से अधिक जानवरों में संवेदीकरण विकसित होता है, और एलर्जी संबंधी परीक्षणों के समूह औसत संकेतक नियंत्रण जानवरों से सांख्यिकीय रूप से काफी भिन्न होते हैं। तीव्र और दीर्घकालिक संवेदीकरण प्रभावों की सीमा को सांद्रता के रूप में लिया जाता है, जिस पर एक्सपोज़र (क्रमशः एकल या कई बार) संवेदीकरण 10 जानवरों में से 2-5 में विकसित होता है, और समूह के औसत संकेतक नियंत्रण जानवरों से महत्वपूर्ण रूप से भिन्न नहीं होते हैं।

^ 6. स्वच्छता मानकों के मूल्य का औचित्य

संपूर्ण अनुसंधान योजना का संचालन करते समय एक औद्योगिक रासायनिक एलर्जेन के लिए स्वच्छता मानक के मूल्य का औचित्य तुलना से शुरू होता है लिम सेंस चसाथ लिम चौधरी. उनके अनुपात के आधार पर, एमपीसी को प्रमाणित करने की विधि और मार्क ए (एलर्जेन) की उपस्थिति निर्धारित की जाती है।

कार्य क्षेत्र की हवा में अधिकतम अनुमेय सांद्रता स्थापित करते समय, उन्हें निम्नलिखित प्रावधानों द्वारा निर्देशित किया जाता है।

यदि सीमित मानदंड विषाक्तता है, अर्थात। संवेदीकरण सीमा का मान विषाक्तता सीमा के मान से अधिक है, तो पदार्थ व्यावहारिक रूप से एलर्जेन के रूप में कोई खतरा पैदा नहीं करता है, और इसे सामान्य विषाक्त प्रभाव के रूप में मानकीकृत किया जाता है; इस मामले में, मार्क ए (एलर्जेन) नहीं लगाया गया है।

यदि सामान्य विषाक्त और संवेदीकरण प्रभावों के लिए सीमा मान महत्वपूर्ण रूप से भिन्न नहीं हैं या बराबर हैं, तो पदार्थ को टॉक्सिकोएलर्जिक घावों के विकास के संदर्भ में संभावित रूप से खतरनाक माना जाना चाहिए और इसके सामान्य विषाक्त प्रभाव के अनुसार इसे सामान्य किया जाना चाहिए। निशान ए (एलर्जेन)।

यदि सीमित मानदंड संवेदीकरण है, अर्थात। संवेदीकरण सीमा मान विषाक्तता सीमा मान से कम हैं, तो पदार्थ एक खतरा पैदा करता है एटिऑलॉजिकल कारकएलर्जी संबंधी बीमारियों के लिए, इसे एक औद्योगिक रासायनिक एलर्जेन माना जाता है और इसे मार्क ए (एलर्जेन) के साथ इसके संवेदी प्रभाव के अनुसार मानकीकृत किया जाता है। इस मामले में, रासायनिक एलर्जेन के लिए सुरक्षा कारक तालिका से निर्धारित होता है। 2.

तालिका 2

^ स्टॉक फैक्टर्स केलिम सेंस चकार्य क्षेत्र की हवा में एमपीसी स्थापित करते समय

वायुमंडलीय हवा में संवेदनशील प्रभाव वाले हानिकारक पदार्थों के लिए अधिकतम अनुमेय सांद्रता स्थापित करते समय, बच्चों, बुजुर्गों और विभिन्न बीमारियों वाले लोगों को ध्यान में रखते हुए अधिक कठोर मानदंडों की सिफारिश की जाती है। इस मामले में, न केवल क्रोनिक सेंसिटाइजिंग प्रभाव की सीमा मूल्य को ध्यान में रखा जाता है, बल्कि फॉर्मूला द्वारा निर्धारित क्रोनिक सेंसिटाइजिंग प्रभाव के क्षेत्र को भी ध्यान में रखा जाता है:

.

आगे, आकार के अनुसार जेड सेंस चसुरक्षा कारक k निर्धारित करें लिम सेंस चतालिका के अनुसार 3 संवेदीकरण प्रभाव के लिए परिणामी एमपीसी मूल्य की तुलना सामान्य विषाक्तता के लिए एमपीसी मूल्य से की जाती है और सबसे कम एमपीसी मूल्य को स्वच्छता मानक के रूप में चुना जाता है। मार्क ए (एलर्जेन) को कार्य क्षेत्र की हवा में अधिकतम अनुमेय एकाग्रता को प्रमाणित करने के सिद्धांतों के अनुसार रखा गया है।

टेबल तीन

^ स्टॉक फैक्टर्स केलिम सेंस चवायुमंडलीय वायु में एमपीसी स्थापित करते समय

इसलिए, यदि क्रोनिक, विषाक्त और संवेदीकरण सीमा का मान मेल खाता है और 0.01 मिलीग्राम/मीटर 3 है, तो जेड सेंस च 1.0 के बराबर होगा. इस मामले में, तालिका के अनुसार. 3, संवेदीकरण प्रभावों के लिए सुरक्षा कारक 3.0 से कम नहीं हो सकता है, और एमपीसी मान 0.003 मिलीग्राम/एम 3 होगा। यदि विषाक्तता के लिए सुरक्षा कारक 2.0 पर सेट है, यानी। अधिकतम अनुमेय सांद्रता मान 0.005 mg/m 3 होगा, यह अनुशंसित है सबसे छोटा मूल्यएमपीसी, यानी 0.003 मिलीग्राम/एम3. लेकिन यदि विचाराधीन उदाहरण में विषाक्तता के लिए सुरक्षा कारक कम से कम 5.0 होना चाहिए, अर्थात। इस प्रभाव के लिए निर्धारित मान और भी छोटा होगा (0.002 mg/m 3), तो इसे चुना जाता है।

त्वरित विधि का उपयोग करके ओबीएल की पुष्टि करते समय, अर्थात। पदार्थ के संवेदीकरण प्रभाव के क्षेत्र की गणना नीचे दिए गए सूत्र का उपयोग करके मूल्य के अनुसार की जाती है और सामान्य विषाक्त प्रभाव से गणना की गई टीबीईएल के मूल्य को जितनी बार कम किया जाता है, कम किया जाता है जेड सेंसैक .

.

इसलिए, यदि विषाक्तता की गणना से यूएलवी का मान 0.2 मिलीग्राम/एम 3 निर्धारित किया जाता है, और जेड सेंस ए.सी 4 के बराबर है, तो परीक्षण पदार्थ का यूएलवी, संवेदीकरण प्रभाव को ध्यान में रखते हुए, 0.05 मिलीग्राम/एम 3 (0.2:4) होगा। लेबल ए (एलर्जेन) एमपीसी को प्रमाणित करने के लिए उपयोग किए जाने वाले सिद्धांतों के अनुसार रखा गया है।

सादृश्य द्वारा मानकीकरण करते समय, यदि किसी पदार्थ के कारण होने वाली संवेदीकरण की आवृत्ति और तीव्रता एक संदर्भ एलर्जेन के संपर्क से मेल खाती है, तो एमएसी या यूएलवी को ए (एलर्जेन) के रूप में चिह्नित संदर्भ एलर्जेन मानक मान के स्तर पर सेट किया जाता है। यदि संदर्भ एलर्जेन के प्रभाव की तुलना में संवेदीकरण की आवृत्ति और तीव्रता में महत्वपूर्ण विचलन है, तो अनुसंधान का चरण II किया जाता है और एमपीसी या यूएलवी के मूल्य को उचित ठहराने के लिए उपरोक्त प्रावधानों का उपयोग किया जाता है।

खतरा वर्ग निवारक विष विज्ञान में आम तौर पर स्वीकृत नियमों के अनुसार निर्धारित किया जाता है।

जानवरों पर एक प्रयोग में स्थापित एमपीसी मूल्य की एक नैदानिक ​​​​और स्वच्छ सुरक्षा जांच, निवारक विष विज्ञान में आम तौर पर स्वीकृत तकनीकों का उपयोग करके श्रमिकों की कामकाजी परिस्थितियों और स्वास्थ्य स्थिति की तुलना करके, साथ ही एक महामारी विज्ञान और एलर्जी संबंधी परीक्षा के आधार पर की जाती है। श्रमिकों, जिसमें किसी दिए गए औद्योगिक एलर्जेन के प्रति संवेदनशीलता की आवृत्ति और गंभीरता की पहचान करने के लिए चयनात्मक विशिष्ट इम्यूनोएलर्जोलॉजिकल परीक्षण शामिल है।

आवेदन

(जानकारीपूर्ण)

^ ग्रंथ सूची संबंधी जानकारी

1. कार्य क्षेत्र की हवा में औद्योगिक एलर्जी के स्वच्छ विनियमन पर अनुसंधान करना। पद्धति संबंधी सिफ़ारिशें संख्या 2121-80 दिनांक 23 जनवरी 1980। यूएसएसआर के स्वास्थ्य मंत्रालय। रीगा, 1980.

2. आबादी वाले क्षेत्रों की वायुमंडलीय हवा में प्रदूषकों की अधिकतम अनुमेय सांद्रता को प्रमाणित करने के लिए अस्थायी दिशानिर्देश संख्या 4681-88। यूएसएसआर के स्वास्थ्य मंत्रालय। एम, 1989.

3. प्रयोगशाला विधियाँ विशिष्ट निदानरासायनिक एटियलजि के व्यावसायिक एलर्जी रोग। पद्धति संबंधी सिफारिशें संख्या 10-8/94 दिनांक 25 दिसंबर, 1979 यूएसएसआर के स्वास्थ्य मंत्रालय। एम, 1980.

4. अलेक्सेवा ओ.जी., डुएवा एल.ए. औद्योगिक रासायनिक यौगिकों से एलर्जी। एम.: मेडिसिन, 1978. - 242 पी।

5. डुएवा एल.ए., कोगन वी.यू., सुवोरोव एस.वी., श्टेरेंगार्ट्स आर.वाई.ए. औद्योगिक एलर्जी। एम. यूएसएसआर की प्रकृति संरक्षण के लिए राज्य समिति के अंतर्राष्ट्रीय परियोजनाओं का केंद्र। एम., 1989. - 203 पी।